Lysistrata ha programmato un incontro tra tutte le donne della Grecia per discutere il piano per porre fine alla guerra del Peloponneso. Mentre Lisistrata aspetta che le donne di Sparta, Tebe e altre aree la incontrino, maledice la debolezza delle donne. Lysistrata prevede di chiedere alle donne di rifiutare il sesso con i loro mariti fino a quando non sarà stato firmato un trattato di pace. Lisistrata ha anche fatto piani con le donne anziane di Atene (il coro di donne anziane) per conquistare l’Akropolis più tardi quel giorno., Le donne delle varie regioni finalmente si riuniscono e Lysistrata li convince a giurare che tratterranno il sesso dai loro mariti fino a quando entrambe le parti non firmeranno un trattato di pace. Mentre le donne sacrificano una bottiglia di vino agli Dei per celebrare il loro giuramento, sentono i suoni delle donne anziane che prendono l’Akropolis, la fortezza che ospita il tesoro di Atene.

In Lysistrata ci sono due cori: il Coro di vecchi e il Coro di vecchie donne. Un Koryphaios conduce entrambi i cori., Il Coro di uomini è il primo ad apparire sul palco portando legna e fuoco alle porte dell’Akropolis. Il Coro degli uomini è un vecchio e bedraggled gruppo di uomini che hanno grande difficoltà con il legno e le grandi pentole di terra di fuoco che portano. Gli uomini pianificano di fumare le donne fuori dall’Akropolis. Anche il coro di donne anziane si avvicina all’Akropolis, portando brocche d’acqua per spegnere i fuochi degli uomini. Il Coro delle Donne Anziane è vittorioso nella gara tra i cori e trionfalmente versa le brocche d’acqua sulle teste degli uomini., Il Commissario, un magistrato nominato, arriva all’Akropolis in cerca di fondi per le navi della marina. Il Commissario è sorpreso di trovare le donne all’Akropolis e ordina ai suoi poliziotti di arrestare Lysistrata e le altre donne. In una battaglia umoristica, che comporta poco contatto fisico, i poliziotti sono spaventati. Il Commissario coglie l’occasione per dire agli uomini di Atene che sono stati troppo generosi e hanno concesso troppa libertà alle donne della città. Mentre i poliziotti scappano, il Commissario e Lysistrata sono lasciati a discutere sulla guerra del Peloponneso., Lysistrata sostiene che la guerra è una preoccupazione per le donne in particolare e lei aggiunge i suoi due centesimi su come la città dovrebbe essere gestito, disegnando un’analogia elaborata per dimostrare che Atene dovrebbe essere strutturato come una donna avrebbe filare lana. Lysistrata dice al Commissario che la guerra è una preoccupazione delle donne perché le donne hanno sacrificato molto per questo—le donne hanno dato i loro mariti e i loro figli allo sforzo. Lysistrata aggiunge che ora è difficile per una donna trovare un marito. Le donne vestono beffardamente il Commissario come una donna.,

Il giorno dopo, o forse un tempo considerevole dopo, il sex-strike ideato all’inizio del testo, inizia ad avere effetto sugli uomini. Lisistrata vede Kinesias, marito di Mirra, avvicinarsi all’Akropolis. Kinesias ha un’erezione completa ed è disperato per sua moglie. Mirra rifiuta di avere rapporti sessuali con Kinesias fino a quando non esiste la pace tra Atene e Sparta. Kinesias dice a Myrrhine che suo figlio ha bisogno di lei, lui ha bisogno di lei e lui la ama e Myrrhine finge di ascoltare le sue suppliche frustrate., Mirra suggerisce che potrebbe fare l’amore con Kinesias, ma ritarda andando ripetutamente nell’Akropolis per prendere le cose per rendere la coppia confortevole. Mentre Kinesias promette di pensare solo a un trattato di pace per Atene e Sparta, Mirra scompare nell’Akropolis e lascia il marito in grande dolore.

Un Araldo spartano si avvicina all’Akropolis e lui, come Kinesias, soffre di un’erezione. Lo spartano descrive la situazione disperata dei suoi compatrioti e chiede un trattato. Le delegazioni di entrambi gli stati si incontrano poi all’Akropolis per discutere della pace., A questo punto, tutti gli uomini hanno erezioni complete. Lisistrata esce dall’Akropolis con la sua serva nuda, Pace. Mentre gli uomini sono completamente distratti dalla Pace, Lysistrata insegna loro sulla necessità di riconciliazione tra gli stati della Grecia. Lysistrata ragiona che, poiché sia Atene che Sparta sono di un patrimonio comune e perché in precedenza si sono aiutati l’un l’altro e hanno un debito l’uno con l’altro, le due parti non dovrebbero combattere. Usando la Pace come mappa della Grecia, i leader spartani e ateniesi decidono i diritti terrieri che metteranno fine alla guerra., Dopo che entrambe le parti sono d’accordo, Lysistrata restituisce le donne agli uomini e ne consegue una grande festa. Il gioco si conclude con una canzone cantata all’unisono dal Coro di vecchi e il coro di vecchie donne mentre tutti ballano.