Ce test démontre la présence de catalase, une enzyme qui catalyse la libération d’oxygène du peroxyde d’hydrogène (H2O2). Il est utilisé pour différencier les bactéries qui produisent une enzyme catalase, telles que les staphylocoques, des bactéries productrices de non-catalase telles que les streptocoques. Normalement, 3% H2O2 est utilisé pour la culture de routine tandis que 15% H2O2 est utilisé pour la détection de la catalase dans les anaérobies.,
principe du test de Catalase
l’enzyme catalase intervient dans la dégradation du peroxyde d’hydrogène en oxygène et en eau. La présence de l’enzyme dans un isolat bactérien est évidente lorsqu’un petit inoculum est introduit dans le peroxyde d’hydrogène et que l’élaboration rapide de bulles d’oxygène se produit. Le manque de catalase est évident par un manque ou une faible production de bulles. La culture ne devrait pas avoir plus de 24 heures.,
Les bactéries se protègent ainsi de l’effet létal du peroxyde d’hydrogène qui s’accumule en tant que produit final du métabolisme aérobie des glucides.
but ou utilisations du test de Catalase
- le streptocoque Entérococcuseur morphologiquement similaire (catalase négative) et le staphylocoque (catalase positive) peuvent être différenciés en utilisant le test de catalase.
- également utile pour différencier les bactéries aérobies et anaérobies obligatoires.
- Le test de catalase semi-quantitatif est utilisé pour l’identification de Mycobacterium tuberculosis.,
- Il est utilisé pour différencier les souches aérotolérantes de Clostridium, qui sont catalases négatives, des espèces de bacilles, qui sont positives.
- Le test de Catalase peut être utilisé comme aide à l’identification des Enterobacteriaceae.
procédure du test de Catalase
- verser 1-2 ml de solution de peroxyde d’hydrogène dans un tube à essai.
- à l’aide d’un bâton de bois stérile ou d’une tige de verre, prélever plusieurs colonies de l’organisme d’essai de 18 à 24 heures et immerger dans la solution de peroxyde d’hydrogène.
- observer pour un bouillonnement immédiat.,
méthode de la lame
- utilisez une boucle ou un bâton en bois stérile pour transférer une petite quantité de croissance de colonie à la surface d’une lame de verre propre et sèche.
- placez une goutte de 3% H2O2 dans la lame de verre.
- Observer l’évolution des bulles d’oxygène.
interprétation du résultat du test de Catalase et exemples
positif: bulles abondantes produites, bouillonnement actif
exemples: staphylocoques, microcoques, Listeria, Corynebacterium diphtheriae, Burkholderia cepacia, Nocardia, la famille des Enterobacteriaceae (Citrobacter, E., coli, Enterobacter, Klebsiella, Shigella, Yersinia, Proteus, Salmonella, Serratia), Pseudomonas, Mycobacterium tuberculosis, Aspergillus, Cryptococcus et Rhodococcus equi.
Négatif: Pas ou très peu de bulles produites.
exemples: Streptococcus et Enterococcus spp
contrôle de la qualité du test de Catalase
positif: Staphylococcus aureus– ATCC 33592
négatif: Enterococcus faecalis– ATCC 29212
Précautions du Test de Catalase
- Les organismes testés ne doivent pas être prélevés dans une gélose sanguine., Les globules rouges contiennent de la catalase et leur présence donnera un test faussement positif.
- La Culture doit avoir entre 18 et 24 heures.
- le peroxyde d’Hydrogène doit être frais, car il est très instable.
- boucle de fil de Fer ne doit pas être utilisé.
- certaines bactéries produisent une peroxydase qui catalyse une dégradation du peroxyde d’hydrogène provoquant une réaction faiblement positive; (quelques bulles élaborées lentement). Cela ne doit pas être confondu avec une réaction vraiment positive.
- ne pas ajouter d’organisme au réactif, en particulier si des boucles d’inoculation contenant du fer sont utilisées., Les boucles contenant du fer provoqueront des résultats de test faussement positifs si elles sont exposées au peroxyde d’hydrogène.