l’antiglobuline, ou test de Coombs, fait partie des tests de compatibilité que tout patient qui recevra une transfusion de globules rouges doit subir. Ce test est également essentiel dans le travail de diagnostic des patients atteints d’anémie dont l’origine n’est pas facilement déterminée et lorsque l’étiologie doit être identifiée avec précision.

en 1945, Robin Coombs, Arthur Mourant et Rob Race ont décrit un test pour détecter les anticorps anti-Rho (anti-D) non agglutinants.,1 à l’origine, le test a été conçu par Robin Coombs dans le cadre de ses études de troisième cycle au Laboratoire de Race et Mourant à Cambridge, en Angleterre, en 1945. Son objectif était d’étudier les caractéristiques des anticorps impliqués dans le contexte de ce qu’on appelait l’érythroblastose fœtale, aujourd’hui appelée maladie hémolytique du nouveau-né (HDN), causée le plus souvent par l’incompatibilité entre une mère Rh-négative sensibilisée lors d’une grossesse précédente, qui produit des anticorps IgG anti-D capables de passer la barrière placentaire en raison de leur petite taille qui recouvrent ensuite les globules rouges fœtaux., Ceux-ci sont ensuite phagocytés dans la rate et le foie, organes qui, en plus de leurs autres fonctions, maintiennent l’hématopoïèse extramédullaire chez le fœtus pour compenser l’anémie résultant de l’hémolyse. Plus tard, le test de Coombs a été utilisé pour démontrer la présence d’anticorps incomplets qui recouvraient les érythrocytes in vivo, comme on le voit dans les cas d’anémie hémolytique auto-immune (AHA). La description de la méthode et son application dans diverses maladies hématologiques ont été publiées dans The Lancet et le British Journal of Experimental Pathology en 1945 et 1946, respectivement.,2

Les principes du test d’antiglobuline sont les suivants: lorsque des immunoglobulines de la classe des IgG (gamma globuline) et du complément (bêta globuline) d’origine humaine sont injectées à différents lapins, elles produisent des anticorps IgG contre ces globulines, qui sont ensuite mélangés en laboratoire pour produire le réactif de Coombs à large spectre, utilisé dans la pratique, Les molécules D’antiglobuline IgG du lapin agissent comme un pont, qui unit les anticorps IgG incomplets couvrant les globules rouges adjacents, provoquant l’agglutination et la visualisation de la réaction à l’œil nu, qui peut être vu dans un tube à essai ou une carte de gel, interprété comme un test de Coombs positif.

Il existe deux variantes de ce test. Lorsqu’il est utilisé pour détecter les anticorps liés aux érythrocytes in vivo, il est connu sous le nom de test d’antiglobuline direct ou de test de Coombs direct., D’autre part, lorsque l’antiglobuline est utilisée pour détecter la présence in vitro d’anticorps libres dans le sérum après incubation dans la phase de Coombs de la correspondance croisée, on parle de test indirect d’antiglobuline, ou de test indirect de Coombs. Cette variante du test est celle qui est utilisée dans la détection d’anticorps anti-D dans le sérum maternel des femmes qui sont antigènes d négatifs, ainsi que la recherche et l’identification d’anticorps dans le sérum lorsqu’un panel d’érythrocytes commerciaux, dont le phénotype est connu, est utilisé.,3,4

Applicationsle test Coombs direct

• dans la recherche d’anticorps, tels que ceux chez les patients atteints d’anémie hémolytique auto-immune.

• dans l’étude des alloanticorps, tels que chez les nouveau-nés souffrant d’une maladie hémolytique du nouveau-né.

• Pour la documentation d’une réaction transfusionnelle hémolytique.

Le test de Coombs indirect

• Dans la détection d’irrégularités d’anticorps dans le sérum du patient.

• Dans la détermination des cellules rouges du sang des phénotypes.

• dans le cadre du test de correspondance croisée.,

méthodes manuelles et automatiques pour le test de Coombs

on peut envisager, en général: (1) les techniques de tubes à essai, qui étaient traditionnelles et sont maintenant pratiquement inutilisées, (2) les techniques de microplaque et (3) les techniques d’agglutination en colonnes de gel. Les méthodes en phase solide (gel, perles de verre et microplaques) sont apparues dans les années 90 et ont connu une utilisation généralisée au Mexique depuis l’an 2000. Actuellement, la technique la plus utilisée est celle des cartes avec des colonnes de gel.

le test de Gel

en 1990, Lapierre met au point un système de tests de gel.,5 Ceux-ci étaient basés sur l’utilisation de particules de gel dextran acrylamide, une matrice de gel qui agissait comme un filtre, empêchant le passage des globules rouges agglutinés et piégeant ainsi les globules rouges à la surface du gel en fonction de leur taille, ce qui constitue un test positif. Une réaction négative forme un bouton de globules rouges non agglutinés au bas du microtube., La carte de gel contient 6 microtubes, ce qui permet de déterminer 6 antigènes et anticorps différents, généralement abo groupe sanguin (direct et inverse) et Rh (d-antigène), des tests de compatibilité et des tests de Coombs. Ces tests peuvent être effectués manuellement ou automatiquement.,5

parmi les avantages de l’automatisation figurent les suivants: un plus grand nombre d’échantillons peuvent être analysés, les érythrocytes lavés ne sont pas nécessaires, la précision et la reproductibilité sont améliorées, la subjectivité dans l’interprétation des résultats est éliminée, les résultats peuvent être conservés pendant des heures et le travail manuel est réduit, minimisant la sensibilité aux erreurs

le test de Coombs direct

lorsque le test d’antiglobuline direct est positif, cela signifie que des anticorps IgG incomplets ou des fragments du complément (en particulier C3d), sont présents, sur les érythrocytes., En revanche, lorsqu’il n’y a pas d’agglutination (test négatif), ces anticorps ne sont pas présents à la surface des érythrocytes (Fig. 1).6

Un test de Coombs direct négatif ne signifie pas nécessairement qu’il n’y a pas d’anticorps incomplets sur les globules rouges, car les réactifs habituels des antiglobulines polyspécifiques humaines, utilisés quotidiennement dans les banques de sang, ne réagissent que lorsqu’il y a au moins 200 molécules D’IgG ou plus par érythrocyte. De la même manière, si l’anticorps impliqué est un IgA, comme dans certains cas d’anémie hémolytique auto-immune, le test sera négatif, car le réactif de Coombs standard ne contient pas d’anticorps anti-IgA.,7,8

le test indirect de Coombs

le test indirect d’antiglobuline humaine est positif lorsqu’il y a des anticorps IgG libres dans le sérum, comme c’est le cas pour la maladie hémolytique du nouveau-né, le test est également couramment utilisé pour l’identification d’anticorps irréguliers (inattendus) utilisant un panel commercial de globules rouges (Fig. 1).,6

En conclusion, depuis son introduction au laboratoire clinique il y a 70 ans, le test de Coombs a évolué techniquement, et ses principes continuent d’être applicables aujourd’hui, ce qui fait de ce test simple et économique l’un des plus polyvalents et importants utilisés dans le diagnostic des maladies hématologiques et dans la pratique sûre de la médecine transfusionnelle.

Financement

aucun soutien financier n’a été fourni.

Conflit d’intérêts

Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à déclarer.