le test de coagulase a traditionnellement été utilisé pour différencier Staphylococcus aureus des staphylocoques à coagulase négative. S. aureus produit deux formes de coagulase (c.-à-d., coagulase liée et coagulase libre). La coagulase liée, autrement connue sous le nom de « facteur d’agglutination », peut être détectée en effectuant un test de coagulase à glissière, et la coagulase libre peut être détectée à l’aide d’un test de coagulase à tube.
Slide testEdit
un test de coagulase slide est exécuté avec un contrôle négatif pour exclure l’autoagglutination., Deux gouttes de solution saline sont placées sur la lame étiquetée avec le numéro de l’échantillon, Test (T) et contrôle (C). Les deux gouttes salines sont émulsionnées avec l’organisme d’essai à l’aide d’une boucle de fil, d’un fil droit ou d’un bâton en bois. Une goutte de plasma (le plasma de lapin anticoagulé avec de L’EDTA est recommandé) est placée sur la goutte saline inoculée correspondant au test, et bien mélangée, puis la lame est secouée doucement pendant environ 10 Secondes.
- si ‘positif’, un agglutinement macroscopique serait observé dans le plasma en 10 secondes, sans agglutination dans la goutte saline.,
- Si ‘négatif’, aucun agglutinement ne sera observé.
Si le test de coagulase sur lame est négatif, un test sur tube devrait suivre comme confirmation. L’agglutination dans les deux gouttes est une indication d’autoagglutination, donc un test de tube doit être effectué. Le test de Tube n’est pas effectué dans chaque établissement, mais la majeure partie du résultat dépend des hémocultures du laboratoire.,
test en Tube
caillot de fibrine formé dans un tube à essai par la réaction de coagulase
le test en tube utilise du plasma de lapin qui a été inoculé avec une colonie staphylococcique (c.-à-d. des cocci Gram positifs qui sont positifs à la catalase). Le tube est ensuite incubé à 37 °C pendant 1,5 heure. Si négatif, l’incubation est poursuivie jusqu’à 18 heures.
- si « positif » (par exemple, la colonie suspecte est S., aureus), le plasma coagulera, entraînant un caillot (parfois le caillot est si prononcé, le liquide se solidifiera complètement).
- si ‘négatif’, le plasma reste un liquide. Le résultat négatif peut être S. epidermidis mais seul un test d’identification plus détaillé peut le confirmer, en utilisant des tests biochimiques comme dans les méthodes de tests d’index de profil analytique. Un faux négatif peut être perçu si l’échantillon ne refroidit pas pendant environ 30 minutes à température ambiante ou 10 minutes au congélateur, étant donné que le sérum peut fondre. Si vraiment négatif, le sérum restera liquide après refroidissement.,
- liste des staphylocoques à coagulase positive: Staphylococcus aureus subsp. anaerobius, S. aureus subsp. or, S. dauphin, Saint-hyicus, S. intermedius, S. lutrae, et Staphylococcus schleiferi subsp. coagulans.
- liste des staphylocoques à coagulase négative d’importance clinique: S. saprophyticus, S. cohnii subsp. cohnii, S. cohnii subsp. urealyticum, S. captitus subsp. captitus, S. warneri, S. man, S. epidermidis, S. de la chèvre et s. de Lyon