Lysistrata har planlagt et møde mellem alle Grækenlands kvinder for at diskutere planen om at afslutte den Peloponnesiske Krig. Mens Lysistrata venter på kvinderne i Sparta, Theben, og andre områder for at møde hende, forbander hun kvindernes svaghed. Lysistrata planlægger at bede kvinderne om at nægte se.med deres mænd, indtil der er underskrevet en fredsaftale. Lysistrata har også lavet planer med de ældre kvinder i Athen (koret af gamle kvinder) for at beslaglægge Akropolis senere på dagen., Kvinderne fra de forskellige regioner samles endelig, og Lysistrata overbeviser dem om at sværge en ed om, at de vil tilbageholde køn fra deres mænd, indtil begge sider underskriver en fredsaftale. Da kvinderne ofrer en flaske vin til guderne for at fejre deres ed, hører de lyden af de ældre kvinder, der tager Akropolis, fæstningen, der huser statskassen i Athen.

i Lysistrata er der to kor—koret af gamle mænd og koret af gamle kvinder. En Koryphaios fører begge omkvæd., Koret af mænd vises først på scenen, der bærer træ og ild til Akropolis porte. Koret af mænd er en gammel og bedraggled flok mænd, der har store vanskeligheder med træet og de store lerkrukker med ild, de bærer. Mændene planlægger at ryge kvinderne ud af Akropolis. Koret af gamle kvinder nærmer sig også Akropolis, der bærer kander med vand for at slukke mændens brande. Koret af gamle kvinder sejrer i konkurrencen mellem korene og hælder triumferende kannerne med vand over mænds hoveder., Kommissæren, en udnævnt dommer, kommer til Akropolis for at søge midler til flådeskibene. Kommissæren er overrasket over at finde kvinderne i Akropolis og beordrer sine politimænd til at arrestere Lysistrata og de andre kvinder. I en humoristisk kamp, der involverer lidt fysisk kontakt, er politimændene bange. Kommissæren benytter lejligheden til at fortælle Athens mænd, at de har været for generøse og tilladt for meget frihed med byens kvinder. Da politimændene løber væk, er kommissæren og Lysistrata tilbage til at diskutere om den Peloponnesiske Krig., Lysistrata hævder, at krigen især er en bekymring for kvinder, og hun tilføjer sine to cent til, hvordan byen skal køres, tegning af en detaljeret analogi for at vise, at Athen skulle struktureres, da en kvinde ville spinde uld. Lysistrate fortæller Kommissæren, at krig er et problem for kvinder, fordi kvinder har ofret meget for det—kvinder har givet deres mænd og deres sønner til indsatsen. Lysistrata tilføjer, at det nu er svært for en kvinde at finde en mand. Kvinderne klæder hånligt kommissæren som kvinde.,

den næste dag, eller måske nogen lang tid bagefter, begynder den se .strejke, der er udtænkt i begyndelsen af teksten, at træde i kraft på mændene. Lysistrata pletter Kinesias, mand af Myrrhine, nærmer sig Akropolis. Kinesias har en fuld erektion og er desperat for sin kone. Myrrhine nægter at have samleje med Kinesias, indtil der findes fred mellem Athen og Sparta. Kinesias fortæller Myrrhine, at hendes barn har brug for hende, han har brug for hende, og han elsker hende, og Myrrhine foregiver at lytte til hans frustrerede anbringender., Myrrhine antyder, at hun måske elsker Kinesias, men forsinker ved at gå gentagne gange ind i Akropolis for at hente ting for at gøre parret behageligt. Da Kinesias lover kun at tænke på en fredsaftale for Athen og Sparta, forsvinder Myrrhine ind i Akropolis og efterlader sin mand i stor smerte.en spartansk Herald nærmer sig Akropolis, og han lider ligesom Kinesias en erektion. Spartaneren beskriver hans landsmænds desperate situation og beder om en traktat. Delegationer fra begge stater mødes derefter i Akropolis for at diskutere fred., På dette tidspunkt har alle mændene fuld erektion. Lysistrata kommer ud af Akropolis med sin nøgne tjenerinde, Fred. Mens mændene er fuldt distraheret af fred, belærer Lysistrata dem om behovet for forsoning mellem staterne i Grækenland. Lysistrata begrunder, at fordi både Athen og Sparta er af fælles arv, og fordi de tidligere har hjulpet hinanden og skylder hinanden en gæld, bør de to sider ikke kæmpe. Ved hjælp af fred som et kort over Grækenland beslutter de spartanske og athenske ledere jordrettigheder, der vil afslutte krigen., Efter begge sider er enige, Lysistrata giver kvinderne tilbage til mændene og en stor fest ensues. Stykket slutter med en sang sunget i kor af gamle mænd og koret af gamle kvinder, mens alle danser.