Das Hämozytometer ist in 9 Hauptquadrate von 1 mm x 1 mm Größe unterteilt. Die vier Coner Quadrate (gekennzeichnet durch das rote Quadrat) sind weiter in 4 x 4 Gitter unterteilt. Die Höhe der mit dem Deckglas gebildeten Kammer beträgt 0,1 mm, so dass eine 1 mm x 1 mm x 0,1 mm Kammer ein Volumen von 0,1 mm3 oder 10-4 ml hat.
Um Zellen mit einem Hämozytometer zu zählen, fügen Sie 15-20µl Zellsuspension zwischen dem Hämozytometer und dem Deckglas mit einem P-20-Pipettierer hinzu., Das Ziel ist es, ungefähr 100-200 Zellen/Quadrat zu haben. Zählen Sie die Anzahl der Zellen in allen vier äußeren Quadraten dividieren durch vier (die mittlere Anzahl der Zellen / Quadrat). Die Anzahl der Zellen pro Quadrat x 104 = die Anzahl der Zellen / ml Suspension. Dieses Protokoll funktioniert gut für entweder anhaftende Säugetierzellen, die trypsinisiert wurden, oder für Suspensionszellen, einschließlich Sf9-Insektenzellen. Rote Blutkörperchen sind normalerweise zu klein und zahlreich für dieses Protokoll und verwenden stattdessen das mittlere Quadrat.
Wenn Sie fertig sind, sprühen Sie das Hämozytometer ein und bedecken Sie es mit 70% Ethanol, um die Zellen abzutöten., Waschen Sie beide mit deionisiertem Wasser und wischen Sie sie mit einem Kimwipe trocken. Wickeln Sie eine saubere Kimwipe ein und kehren Sie zur Aufbewahrungsbox zurück. Hinweis: Die Deckblätter für das Hämozytomer bestehen aus einem speziellen dickeren / flacheren Glas. Bitte versuchen Sie zu vermeiden brechen oder zu verlieren. Wenn Sie dies tun, ordnen Sie Hämozytomer-Cover-Slips neu, keine regulären Cover-Slips.