Dieser Test zeigt das Vorhandensein von Katalase, einem Enzym, das die Freisetzung von Sauerstoff aus Wasserstoffperoxid (H2O2) katalysiert. Es wird verwendet, um jene Bakterien, die ein Enzym Katalase produziert, wie Staphylokokken, von nicht-Katalase produzierenden Bakterien wie Streptokokken zu unterscheiden. Normalerweise werden 3% H2O2 für die Routinekultur verwendet, während 15% H2O2 für den Nachweis von Katalase in Anaerobier verwendet wird.,

Prinzip des Katalasetests

Das Enzym Katalase vermittelt den Abbau von Wasserstoffperoxid in Sauerstoff und Wasser. Die Anwesenheit des Enzyms in einem bakteriellen Isolat ist offensichtlich, wenn ein kleines Inokulum in Wasserstoffperoxid eingeführt wird und die schnelle Ausarbeitung von Sauerstoffblasen auftritt. Der Mangel an Katalase zeigt sich in einer fehlenden oder schwachen Blasenproduktion. Die Kultur sollte nicht älter als 24 Stunden sein.,

Bakterien schützen sich dadurch vor der tödlichen Wirkung von Wasserstoffperoxid, das sich als Endprodukt des aeroben Kohlenhydratstoffwechsels ansammelt.

Zweck oder Verwendung des Katalase-Tests

• Die morphologisch ähnlichen Enterococcusor Streptococcus (Katalase negativ) und Staphylococcus (Katalase positiv) können mit dem Katalase-Test differenziert werden.
• Auch wertvoll bei der Differenzierung von aeroben und obligaten anaeroben Bakterien.
• Der semiquantitative Katalasetest wird zur Identifizierung von Mycobacterium tuberculosis verwendet.,
• Es wird verwendet, um aerotolerante Clostridium-Stämme, die Katalase-negativ sind, von Bacillus-Arten, die positiv sind, zu unterscheiden.
• Der Katalasetest kann zur Identifizierung von Enterobacteriaceae verwendet werden.

Verfahren des Katalasetests

1. Gießen Sie 1-2 ml Wasserstoffperoxidlösung in ein Reagenzglas.
2. Nehmen Sie mit einem sterilen Holzstab oder einem Glasstab mehrere Kolonien des 18-bis 24-stündigen Testorganismus und tauchen Sie in die Wasserstoffperoxidlösung ein.
3. Für sofortiges Sprudeln beobachten.,

Slide Methode

1. Verwenden sie eine schleife oder sterile holz stick zu übertragen eine kleine menge von kolonie wachstum in die oberfläche von einem sauberen, trockenen glas rutsche.
2. Legen Sie einen Tropfen von 3% H2O2 in den Glasschieber.
3. Beobachten Sie die Entwicklung von Sauerstoffblasen.

Ergebnis Interpretation von Katalase Test und Beispiele

Positive: Reichlich blasen produziert, aktive sprudeln

Beispiele: Staphylokokken, Mikrokokken, Listerien, Corynebacterium diphtheriae, Burkholderia cepacia, Nocardia, die familie Enterobacteriaceae (Citrobacter, E., coli, Enterobacter, Klebsiella, Shigella, Yersinia, Proteus, Salmonella, Serratia), Pseudomonas, Mycobacterium tuberculosis, Aspergillus, Cryptococcus, und Rhodococcus equi.

Negativ: Keine oder nur sehr wenige Blasen erzeugt.

Beispiele: Streptococcus und Enterococcus spp

Qualitätskontrolle des Katalasetests

Positiv: Staphylococcus aureus– ATCC 33592

Negativ: Enterococcus faecalis– ATCC 29212

Vorsichtsmaßnahmen des Katalasetests

• Die Testorganismen sollten nicht aus der Blut-Agar-Kultur entnommen werden., Rote Blutkörperchen enthalten Katalase und ihre Anwesenheit wird einen falsch positiven Test ergeben.
• Kultur sollte 18 bis 24 Stunden alt.
• Wasserstoffperoxid muss frisch sein, da es sehr instabil ist.
• Eisen-Draht Schleife sollte nicht verwendet werden.
• Einige Bakterien produzieren eine Peroxidase, die einen Abbau von Wasserstoffperoxid katalysiert, wodurch die Reaktion schwach positiv ist; (ein paar Blasen langsam ausgearbeitet). Dies sollte nicht mit einer wirklich positiven Reaktion verwechselt werden.
• Fügen Sie dem Reagenz keinen Organismus hinzu, insbesondere wenn eisenhaltige Impfschleifen verwendet werden., Eisenhaltige Schleifen verursachen falsch positive Testergebnisse, wenn sie Wasserstoffperoxid ausgesetzt werden.