El hemocitómetro se divide en 9 cuadrados principales de 1 mm x 1 mm de tamaño. Los cuatro cuadrados coner (identificados por el cuadrado rojo) se subdividen en cuadrículas de 4 x 4. La altura de la cámara formada con el vidrio de cubierta es de 0,1 mm, por lo que una cámara de 1 mm x 1 mm x 0,1 mm tiene un volumen de 0,1 mm3 o 10-4 ml.

para contar las células usando un hemocitómetro, agregue 15-20µl de suspensión celular entre el hemocitómetro y el vidrio de cubierta usando un Pipetman P-20., El objetivo es tener aproximadamente 100-200 celdas / cuadrado. Cuente el número de celdas en los cuatro cuadrados externos divida por cuatro (el número medio de celdas/cuadrado). El número de células por cuadrado x 104 = El número de células / ml de suspensión. Este protocolo funciona bien para las células de mamíferos adherentes que han sido tripsinizadas o para las células de suspensión, incluidas las células de insectos Sf9. Los glóbulos rojos son típicamente demasiado pequeños y numerosos para este protocolo y utilizan el cuadrado medio en su lugar.

Cuando termine, rocíe el hemocitómetro y cubra el deslizamiento con etanol al 70% para matar las células., Lavar ambos con agua desionizada y secar con un Kimwipe. Envolver en un Kimwipe limpio y volver a la caja de almacenamiento. Tenga en cuenta que las tapas para el hemocitómero están hechas de un vidrio especial más grueso/plano. Por favor, trate de evitar romperlo o perderlo. Si lo hace, reordenar hemocytomer cubreobjetos, no regular de la cubierta se desliza.