la prueba de la coagulasa se ha utilizado tradicionalmente para diferenciar el Staphylococcus aureus de los estafilococos coagulasa negativos. S. aureus produce dos formas de coagulasa (es decir, coagulasa unida y coagulasa libre). La coagulasa unida, también conocida como «factor de aglutinación», se puede detectar llevando a cabo una prueba de coagulasa de diapositiva, y la coagulasa libre se puede detectar utilizando una prueba de coagulasa de tubo.
prueba de portaobjetos
se realiza una prueba de coagulasa de portaobjetos con un control negativo para descartar la autoaglutinación., Se colocan dos gotas de solución salina en el portaobjetos con el número de muestra, la prueba (T) y el control (C). Las dos gotas Salinas se emulsionan con el organismo de prueba usando un lazo de alambre, alambre recto o palo de madera. Una gota de plasma (se recomienda plasma de conejo anticoagulado con EDTA) se coloca en la gota salina inoculada correspondiente a la prueba, y se mezcla bien, luego el portaobjetos se mece suavemente durante aproximadamente 10 segundos.
- Si es «positivo», se observaría aglomeración macroscópica en el plasma en 10 segundos, sin aglomeración en la gota salina.,
- Si es «negativo», no se observará aglomeración.
si la prueba de coagulasa es negativa, una prueba de tubo debe seguir como confirmación. La aglutinación en ambas gotas es una indicación de autoaglutinación, por lo que se debe realizar una prueba de tubo. La prueba de tubo no se realiza en cada institución, pero la mayor parte del resultado depende de los cultivos de sangre del laboratorio.,
Test de tubo
un coágulo de fibrina formado en un tubo de ensayo por la reacción de coagulasa
la prueba de tubo utiliza plasma de conejo que ha sido inoculado con una colonia estafilocócica (es decir, cocos grampositivos que son catalasa positiva). El tubo se incuba a 37 ° C durante 1,5 horas. Si es negativo, la incubación se continúa hasta 18 horas.
- Si es ‘positivo’ (por ejemplo, la colonia sospechosa es S., aureus), el plasma coagulará, resultando en un coágulo (a veces el coágulo es tan pronunciado, el líquido se solidificará completamente).
- Si es «negativo», el plasma permanece líquido. El resultado negativo puede ser S. epidermidis, pero solo una prueba de identificación más detallada puede confirmar esto, utilizando pruebas bioquímicas como en los métodos de pruebas de índice de perfil analítico. Se puede percibir un falso negativo si la muestra no se deja enfriar durante unos 30 minutos a temperatura ambiente o 10 minutos en el congelador, dado que el suero puede derretirse. Si es realmente negativo, el suero permanecerá líquido después del enfriamiento.,lista de estafilococos coagulasa-positivos: Staphylococcus aureus subsp. anaerobius, S. aureus subsp. golden, S. dolphin, St.hyicus, S. intermedius, S. lutrae, and Staphylococcus schleiferi subsp. coagulans.
- lista de estafilococos coagulasa negativos de importancia clínica: S. saprophyticus, S. cohnii subsp. cohnii, S. cohnii subsp. urealyticum, S. captitus subsp. captitus, S. warneri, S. man, S. epidermidis, S. de la cabra y S. de Lyon