cellräkning med en Hemocytometer

hemocytometern delas upp i 9 stora rutor av 1mm x 1mm storlek. De fyra konerna (identifierade av Röda torget) är vidare indelade i 4 x 4 galler. Kammarens höjd som bildas med täckglaset är 0,1 mm, så en 1 mm x 1 mm x 0,1 mm kammare har en volym på 0,1 mm3 eller 10-4 ml.

för att räkna celler med en hemocytometer, Lägg till 15-20µl cellsuspension mellan hemocytometern och täckglaset med hjälp av en P-20 Pipetman., Målet är att ha ungefär 100-200 celler / kvadrat. Räkna antalet celler i alla fyra yttre rutor dividera med fyra (det genomsnittliga antalet celler/kvadrat). Antalet celler per kvadrat x 104 = antalet celler/ml suspension. Detta protokoll fungerar bra för antingen vidhäftande däggdjursceller som har trypsiniserats eller för suspensionsceller inklusive Sf9 insektsceller. Röda blodkroppar är vanligtvis för små och många för detta protokoll och använder mitten torget istället.

När du är klar sprutar du hemocytometern och täcker glidningen med 70% etanol för att döda cellerna., Tvätta båda med avjoniserat vatten och torka torrt med en Kimwipe. Vik i en ren Kimwipe och återgå till förvaringsboxen. Observera att täcksliporna för hemocytomern är gjorda av ett speciellt tjockare/plattare glas. Försök att undvika att bryta eller förlora den. Om du gör det, ordna om hemocytomer täcka glider, inte regelbundna täck glider.

Lämna ett svar

Din e-postadress kommer inte publiceras. Obligatoriska fält är märkta *