Acest test demonstrează prezența catalazei, o enzimă care catalizează eliberarea oxigenului din peroxidul de hidrogen (H2O2). Se utilizează pentru a diferenția acele bacterii care produc o enzimă catalază, cum ar fi stafilococii, de bacteriile care nu produc catalază, cum ar fi streptococii. În mod normal, 3% H2O2 este utilizat pentru cultura de rutină, în timp ce 15% H2O2 este utilizat pentru detectarea catalazei în anaerobi.,
principiul testului catalazei
enzima catalază mediază descompunerea peroxidului de hidrogen în oxigen și apă. Prezența enzimei într-un izolat bacterian este evidentă atunci când un inocul mic este introdus în peroxid de hidrogen și apare elaborarea rapidă a bulelor de oxigen. Lipsa catalazei este evidentă printr-o lipsă sau o producție slabă de bule. Cultura nu trebuie să aibă mai mult de 24 de ore.,
bacteriile se protejează astfel de efectul letal al peroxidului de hidrogen care se acumulează ca produs final al metabolismului carbohidraților aerobi.scopul sau utilizările testului catalazei
- streptococul enterococcusor morfologic similar (catalază negativă) și stafilococul (catalază pozitivă) pot fi diferențiate folosind testul catalazei.
- de asemenea, valoros în diferențierea bacteriilor aerobe și obligatorii anaerobe.
- testul catalazei Semiquantitative este utilizat pentru identificarea Mycobacterium tuberculosis.,
- se utilizează pentru a diferenția tulpinile aerotolerante de Clostridium, care sunt catalazice negative, de speciile de bacili, care sunt pozitive.
- testul catalazei poate fi folosit ca un ajutor pentru identificarea Enterobacteriaceae.
procedura de testare a catalazei
- se toarnă 1-2 ml de soluție de peroxid de hidrogen într-o eprubetă.
- folosind un baston steril de lemn sau o tijă de sticlă, luați mai multe colonii ale organismului de testare de 18 până la 24 de ore și scufundați în soluția de peroxid de hidrogen.
- observați pentru barbotare imediată.,
metoda de alunecare
- utilizați o buclă sau un baston steril de lemn pentru a transfera o cantitate mică de creștere a coloniilor pe suprafața unui diapozitiv de sticlă curat și uscat.
- puneți o picătură de 3% H2O2 în lamela de sticlă.
- observați evoluția bulelor de oxigen.
Interpretarea rezultatelor din Testul Catalazei și Exemple
Pozitiv: Copios bule de produse, active barbotare
Exemple: Stafilococi, Micrococci, Listeria, Corynebacterium diphtheriae, Burkholderia cepacia, Nocardia, familia Enterobacteriaceae (Citrobacter, E., coli, Enterobacter, Klebsiella, Shigella, Yersinia, Proteus, Salmonella, Serratia), Pseudomonas, Mycobacterium tuberculosis, Aspergillus, Cryptococcus și Rhodococcus equi.
negativ: nu sau foarte puține bule produse.
Exemple: Streptococcus și Enterococcus spp
de Control al Calității de Testul Catalazei
Pozitive: Staphylococcus aureus– ATCC 33592
Negative: Enterococcus faecalis– ATCC 29212
măsuri de Precauție de Testul Catalazei
- organismele De testare nu ar trebui să fie luate de agar sânge în cultură., Celulele roșii din sânge conțin catalază, iar prezența lor va da un test fals pozitiv.
- cultura ar trebui să aibă vârsta cuprinsă între 18 și 24 de ore.
- peroxidul de hidrogen trebuie să fie proaspăt, deoarece este foarte instabil.
- bucla de sârmă de fier nu trebuie utilizată.unele bacterii produc o peroxidază care catalizează o descompunere a peroxidului de hidrogen determinând reacția să fie slab pozitivă; (câteva bule elaborate lent). Acest lucru nu trebuie confundat cu o reacție cu adevărat pozitivă.
- nu adăugați organism la reactiv, în special dacă se utilizează bucle de inoculare care conțin fier., Buclele care conțin fier vor provoca rezultate fals pozitive ale testelor dacă sunt expuse la peroxid de hidrogen.