Celulă de Numărare cu un Hemocytometer

hemocytometer este divideded în 9 pătrate mari de 1mm x 1mm dimensiune. Cele patru pătrate coner (identificate prin pătratul roșu) sunt subdivizate în continuare în 4 x 4 grile. Înălțimea camerei formate cu geamul de acoperire este de 0,1 mm, deci o cameră de 1 mm x 1 mm x 0,1 mm are un volum de 0,1 mm3 sau 10-4 ml.

Pentru a număra celulele folosind un hemocytometer, se adaugă 15-20µl de suspensie de celule între hemocytometer și capacul de sticlă folosind un P-20 Pipetman., Scopul este de a avea aproximativ 100-200 celule / pătrat. Numărați numărul de celule din toate cele patru pătrate exterioare împărțiți cu patru (numărul mediu de celule/pătrat). Numărul de celule pe pătrat x 104 = Numărul de celule / ml de suspensie. Acest protocol funcționează bine fie pentru celulele aderente de mamifere care au fost tripsinizate, fie pentru celulele de suspensie, inclusiv celulele de insecte Sf9. Celulele roșii din sânge sunt de obicei prea mici și numeroase pentru acest protocol și utilizează în schimb pătratul din mijloc.când ați terminat, pulverizați hemocitometrul și acoperiți alunecarea cu 70% etanol pentru a ucide celulele., Spălați ambele cu apă deionizată și ștergeți-le cu un Kimwipe. Înfășurați într-un Kimwipe curat și reveniți la cutia de depozitare. Notă, alunecările de acoperire pentru hemocitomer sunt realizate dintr-o sticlă specială mai groasă/mai plată. Încercați să evitați ruperea sau pierderea acesteia. Dacă o faceți, reordonați alunecările de acoperire a hemocitomerului, nu alunecările de acoperire obișnuite.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată. Câmpurile obligatorii sunt marcate cu *