antiseptice

în timpul Primului Război Mondial, Fleming împreună cu Leonard Colebrook și Sir Almroth Wright s-au alăturat eforturilor de război și au mutat practic întregul departament de inoculare al St Mary ‘ s la Spitalul militar britanic din Boulogne-sur-Mer. Servind ca locotenent temporar al Corpului Medical al Armatei Regale, a asistat la moartea multor soldați din cauza sepsisului rezultat din rănile infectate. Antisepticele, care au fost folosite la acea vreme pentru a trata rănile infectate, a observat el, au agravat adesea leziunile., Într-un articol publicat în revista medicală The Lancet în 1917, el a descris un experiment ingenios, pe care a reușit să-l conducă ca urmare a propriilor sale abilități de suflare a sticlei, în care a explicat de ce antisepticele ucideau mai mulți soldați decât infecția în sine în timpul războiului., Antiseptice lucrat bine la suprafata, dar rănile adânci tendința de a adăpost de bacterii anaerobe din agent antiseptic, și antiseptice părea pentru a elimina agenți benefice produs protejat de pacienți în aceste cazuri, cel puțin la fel de bine ca au scos bacterii, și nu a făcut nimic pentru a elimina bacteriile care au fost la indemana. Wright a susținut cu tărie constatările lui Fleming, dar, în ciuda acestui fapt, majoritatea medicilor armatei pe parcursul războiului au continuat să folosească antiseptice chiar și în cazurile în care acest lucru a agravat starea pacienților.,descoperirea lizozimei la Spitalul St Mary, Fleming și-a continuat investigațiile în cultura bacteriilor și a substanțelor antibacteriene. Ca savant de cercetare la momentul V. D. Allison a reamintit, Fleming nu a fost curat cercetător și, de obicei, de așteptat neobișnuit bacteriene creșteri în plăci de cultură. Fleming a șicana Allison a lui ” curățenie excesivă în laborator,” și Allison atribuit pe bună dreptate, cum ar untidiness ca succesul experimentelor lui Fleming, și a spus, ” el a fost la fel de ordonat ca el a crezut că am fost, el nu ar fi făcut sale două mari descoperiri.,la sfârșitul anului 1921, în timp ce menține plăci de agar pentru bacterii, a descoperit că una dintre plăci era contaminată cu bacterii din aer. Când a adăugat mucus nazal, a descoperit că mucusul a inhibat creșterea bacteriană. În jurul zonei mucusului era un cerc transparent Transparent (1 cm de mucus), indicând zona de ucidere a bacteriilor, urmată de un inel sticlos și translucid dincolo de care era o zonă opacă care indică o creștere bacteriană normală. În următorul test, el a folosit bacterii menținute în soluție salină care au format o suspensie galbenă., În două minute de la adăugarea mucusului proaspăt, soluția salină galbenă a devenit complet limpede. El și-a extins testele folosind lacrimi, la care au contribuit colegii săi. După cum a amintit Allison, Spunând: „pentru următoarele cinci sau șase săptămâni, lacrimile noastre au fost sursa de aprovizionare pentru acest fenomen extraordinar. Multe au fost lămâile pe care le-am folosit (după eșecul cepei) pentru a produce un flux de lacrimi… Cererea noastră de lacrimi a fost atât de mare, încât însoțitorii de laborator au fost presați în serviciu, primind trei pence pentru fiecare contribuție.,testele sale suplimentare cu spută, cartilaj, sânge, spermă, lichid chist ovarian, puroi și albus de ou au arătat că agentul bactericid a fost prezent în toate acestea. El a raportat descoperirea lui înainte de Cercetarea Medicală Club în decembrie și în fața Societății Regale de anul viitor, dar nu a reușit să stârnească vreun interes, ca Allison a amintit:

am fost prezent la această întâlnire ca Fleming ‘ s guest. Lucrarea sa care descrie descoperirea sa a fost primită fără întrebări și fără discuții, ceea ce a fost cel mai neobișnuit și un indiciu că a fost considerat a fi de nici o importanță., În anul următor a citit o lucrare pe această temă în fața Royal Society, Burlington House, Piccadilly și el și am dat o demonstrație a muncii noastre. Din nou, cu o singură excepție, i s-a acordat puțin comentariu sau atenție.,

Raportare la 1 Mai 1922 problemă de Procedură al Royal Society B: Biological Sciences, sub titlul „Pe un remarcabil bacteriolytic element care se găsește în țesuturi și secreții,” Fleming a scris:

În această comunicare, doresc să atrag atenția asupra sa o substanță prezentă în țesuturi și secreții ale corpului, care este capabil să dizolve rapid anumite bacterii. Deoarece această substanță are proprietăți asemănătoare cu cele ale fermenților, am numit-o” lizozimă ” și se va referi la ea prin acest nume pe tot parcursul comunicării., Lizozimul a fost observat pentru prima dată în timpul unor investigații efectuate pe un pacient care suferă de coriză acută.

aceasta a fost prima descoperire înregistrată a lizozimei. Cu Allison, a publicat studii suplimentare despre lizozim în numărul din octombrie al British Journal of Experimental Pathology în același an. Deși a reușit să obțină cantități mai mari de lizozimă din albușurile de ou, enzima a fost eficientă numai împotriva numărului mic de bacterii inofensive și, prin urmare, a avut un potențial terapeutic redus., Aceasta indică una dintre diferențele majore dintre bacteriile patogene și cele inofensive. Descris în publicația originală, „un pacient care suferă de coryza acută” a fost identificat mai târziu ca Fleming însuși. Carnețelul de cercetare din data de 21 noiembrie 1921-a arătat o schiță de cultura farfurie cu o notă mică: „Staphyloid coc la A. F. nasul lui.”El a identificat, de asemenea, bacterie prezentă în mucus nazal ca Micrococcus Lysodeikticus, dând numele speciei (în sensul de „liza indicator” pentru susceptibilitatea la lysozymal activitate). Specia a fost realocată ca Micrococcus luteus în 1972., „Tulpina Fleming” (NCTC2665) a acestei bacterii a devenit un model în diferite studii biologice. Importanța lizozim nu a fost recunoscută, și Fleming a fost conștient de acest lucru, la adresa lui Prezidențiale de la Societatea Regală de Medicină ședința din 18 octombrie 1932, el a spus:

alege lizozim ca subiect pentru această adresă pentru două motive, în primul rând pentru că am un interes părintesc, în numele, și, în al doilea rând, din cauza importanței sale în legătură cu imunitatea naturală nu pare a fi, în general, apreciat.,

În prelegere Nobel pe 11 decembrie 1945 a menționat pe scurt lizozim, spunând, „Penicilina a fost primul antibiotic I s-a întâmplat să descoperi.”Abia spre sfârșitul secolului 20, adevărata importanță a descoperirii lui Fleming în imunologie a fost realizată, deoarece lizozima a devenit prima proteină antimicrobiană descoperită care face parte din imunitatea noastră înnăscută.,

descoperirea penicilinei

uneori se găsește ceea ce nu se caută. Când m-am trezit imediat după zorii zilei de 28 septembrie 1928, cu siguranță nu intenționam să revoluționez toată medicina descoperind primul antibiotic din lume sau ucigașul de bacterii. Dar cred că a fost exact ceea ce am făcut.,

— Alexander Fleming

Experiment

până în 1927, Fleming investigase proprietățile stafilococilor. El era deja bine cunoscut din munca sa anterioară și își dezvoltase o reputație de cercetător strălucit. În 1928, a studiat variația Staphylococcus aureus cultivată în condiții naturale, după lucrarea lui Joseph Warwick Bigger, care a descoperit că bacteria ar putea crește într-o varietate de tipuri (tulpini). La 3 septembrie 1928, Fleming s-a întors în laboratorul său după ce a petrecut o vacanță cu familia sa la Suffolk., Înainte de a pleca în vacanță, a inoculat stafilococi pe plăcile de cultură și le-a lăsat pe o bancă într-un colț al laboratorului său. La întoarcerea sa, Fleming a observat că o cultură a fost contaminată cu o ciupercă și că coloniile de stafilococi care înconjoară imediat ciuperca au fost distruse, în timp ce alte colonii de stafilococi mai departe erau normale, remarcând faimos „asta e amuzant”. Fleming a arătat cultura contaminată fostului său asistent Merlin Pryce, care i-a amintit: „așa ai descoperit lizozimul.”El a identificat mucegaiul ca fiind din genul Penicillium., El a suspectat că este P. chrysogenum, dar un coleg Charles J. La Touche a identificat-o ca P. rubrum. (Mai târziu a fost corectată ca P. notatum și apoi acceptată oficial ca P. chrysogenum; dar în cele din urmă în 2011, a fost rezolvată ca P. rubens.Laboratorul în care Fleming a descoperit și testat penicilina este păstrat ca Muzeul Laboratorului Alexander Fleming din Spitalul St.Mary, Paddington. Sursa contaminantului fungic a fost stabilită în 1966 ca provenind din camera lui La Touche, care era direct sub cea a lui Fleming.,

Fleming a crescut mucegaiul într-o cultură pură și a constatat că bulionul de cultură conținea o substanță antibacteriană. El a investigat efectul său anti-bacterian asupra multor organisme și a observat că a afectat bacterii precum stafilococi și mulți alți agenți patogeni Gram-pozitivi care provoacă scarlatină, pneumonie, meningită și difterie, dar nu febră tifoidă sau febră paratifoidă, care sunt cauzate de bacterii Gram-negative, pentru care căuta un leac la acea vreme. De asemenea, a afectat Neisseria gonorrhoeae, care provoacă gonoree, deși această bacterie este Gram-negativă., După câteva luni în care a numit-o „suc de mucegai” sau „inhibitor”, el a dat numele de penicilină la 7 martie 1929 pentru substanța antibacteriană prezentă în mucegai.

recepție și publicare

Fleming și-a prezentat descoperirea pe 13 februarie 1929 în fața Clubului de Cercetare Medicală. Discursul său despre „un mediu pentru izolarea bacilului lui Pfeiffer” nu a primit nicio atenție sau comentariu special., Henry Dale, directorul de atunci al Institutului Național de Cercetări Medicale și președinte al întâlnirii, a amintit mult mai târziu că nici măcar nu a simțit niciun punct de importanță izbitoare în discursul lui Fleming. Fleming și-a publicat descoperirea în 1929 în British Journal of Experimental Pathology, dar nu sa acordat prea multă atenție articolului. Problema lui a fost dificultatea producerii penicilinei în cantități mari și, în plus, izolarea compusului principal., Chiar și cu ajutorul lui Harold Raistrick și a echipei sale de biochimiști de la școala de igienă și Medicină Tropicală din Londra, purificarea chimică a fost inutilă. „Ca urmare, penicilina a dispărut în mare parte uitată în anii 1930”, după cum a descris Milton Wainwright.

încă din 1936, nu a existat nicio apreciere pentru penicilină. Când Fleming a vorbit despre importanța sa medicală la cel de-al doilea Congres Internațional de Microbiologie organizat la Londra, nimeni nu l-a crezut., Așa cum Allison, însoțitorul său atât în clubul de cercetare medicală, cât și în Congresul Internațional, a remarcat cele două ocazii:

a sugerat valoarea posibilă a penicilinei pentru tratamentul infecției la om. Din nou, a existat o lipsă totală de interes și nici o discuție. Fleming a fost foarte dezamăgit, dar mai rău a fost să urmeze. A citit o lucrare despre activitatea sa despre penicilină la o întâlnire a Congresului Internațional de Microbiologie, la care au participat cei mai importanți bacteriologi din întreaga lume., Nu a existat nici un sprijin pentru opiniile sale cu privire la posibila sa valoare viitoare pentru prevenirea și tratamentul infecțiilor umane și discuții a fost minimă. Fleming a purtat aceste dezamăgiri stoic, dar nu i-au modificat opiniile și nu l-au împiedicat să-și continue investigația asupra penicilinei.

în 1941, British Medical Journal a raportat că ” nu pare să fi fost considerat posibil util din orice alt punct de vedere.,”

Purificarea și stabilizarea

În Oxford, Ernst Boris Chain și Edward Avraam a fost studiază structura moleculară de antibiotic. Abraham a fost primul care a propus structura corectă a penicilinei. La scurt timp după ce echipa a publicat primele rezultate în 1940, Fleming ia telefonat lui Howard Florey, șeful Departamentului Chain, pentru a spune că va vizita în următoarele zile. Când Chain a auzit că Fleming vine, el a remarcat „Bunule Dumnezeu! Am crezut că a murit.,Norman Heatley a sugerat transferul ingredientului activ al penicilinei înapoi în apă prin schimbarea acidității sale. Acest lucru a produs suficient de droguri pentru a începe testarea pe animale. Au fost mult mai mulți oameni implicați în echipa Oxford și, la un moment dat, întreaga școală de patologie Sir William Dunn a fost implicată în producția sa. După ce echipa a dezvoltat o metodă de purificare a penicilinei într-o primă formă stabilă eficientă în 1940, au urmat mai multe studii clinice, iar succesul lor uimitor a inspirat echipa să dezvolte metode de producție în masă și distribuție în masă în 1945.,Fleming a fost modest în ceea ce privește rolul său în dezvoltarea penicilinei, descriindu-și faima drept „Mitul lui Fleming” și i-a lăudat pe Florey și Chain pentru transformarea curiozității de laborator într-un medicament practic. Fleming a fost primul care a descoperit proprietățile substanței active, oferindu-i privilegiul de ao numi: penicilină. De asemenea, a păstrat, a crescut și a distribuit matrița originală timp de doisprezece ani și a continuat până în 1940 să încerce să obțină ajutor de la orice chimist care avea suficientă pricepere pentru a face penicilină., Dar Sir Henry Harris a spus în 1998: „Fără Fleming, nici Lanț; fara Lant, nu Florey; fără Florey, nu Heatley; fără Heatley, nici penicilină.”Descoperirea penicilinei și dezvoltarea ulterioară a acesteia ca medicament pe bază de rețetă marchează începutul antibioticelor moderne.în primul său studiu clinic, Fleming și-a tratat cercetătorul de cercetare Stuart Craddock care a dezvoltat o infecție severă a antrumului nazal (sinuzită). Tratamentul a început la 9 ianuarie 1929, dar fără niciun efect., Probabil că s-a datorat faptului că infecția a fost cu bacilul gripal (Haemophilus influenzae), bacteria pe care a găsit-o nesusceptibilă la penicilină. Fleming a dat o parte din probele sale originale de penicilină colegului său-chirurg Arthur Dickson Wright pentru testul clinic în 1928. Deși Wright a spus că „părea să funcționeze în mod satisfăcător”, nu există înregistrări ale utilizării sale specifice. Cecil George Paine, patolog la infirmeria Regală din Sheffield și fost student al lui Fleming, a fost primul care a folosit penicilina cu succes pentru tratament medical., El a vindecat infecțiile oculare (conjunctivita) la un adult și trei sugari (conjunctivita neonatală) la 25 noiembrie 1930.de asemenea, Fleming a tratat cu succes conjunctivita severă în 1932. Keith Bernard Rogers, care s-a alăturat St Mary ca student la medicină în 1929, a fost căpitanul echipei de pușcă a Universității din Londra și era pe punctul de a participa la competiția de fotografiere a puștilor inter-spital când a dezvoltat conjunctivită. Fleming și-a aplicat penicilina și l-a vindecat pe Rogers înainte de competiție. Se spune că „penicilina a funcționat și meciul a fost câștigat.,”Cu toate acestea, raportul potrivit căruia” Keith a fost probabil primul pacient tratat clinic cu unguent de penicilină ” nu mai este adevărat, deoarece au apărut dosarele medicale ale lui Paine.

Nu este o bază de afirmare atât în populare și literatura de specialitate ca Fleming a abandonat în mare măsură de penicilină muncă la începutul anilor 1930. În recenzia sa de André Maurois e Viața de Sir Alexander Fleming, Descoperitorul Penicilinei, William L. Kissick mers atât de departe încât să spun că „Fleming a abandonat penicilină în 1932…, Deși destinatarul multor onoruri și autorul multor lucrări științifice, Sir Alexander Fleming nu pare a fi un subiect ideal pentru o biografie.”Aceasta este o informație falsă, deoarece Fleming a continuat să urmărească cercetarea penicilinei. Încă din 1939, CAIETUL lui Fleming arată încercările de a face o producție mai bună de penicilină folosind diferite medii. În 1941, a publicat o metodă de evaluare a eficacității penicilinei., Ca să-chimice de izolare și purificare, Howard Florey și Ernst Boris Chain la Infirmeria Radcliffe din Oxford au luat de cercetare de cercetare pentru producerea în masă, și a obținut cu suporturi de-al doilea Război Mondial militar de proiecte în cadrul SUA și guvernele Britanic.până la mijlocul anului 1942, echipa Oxford a produs compusul pur de penicilină sub formă de pulbere galbenă. În August 1942, Harry Lambert (asociat al fratelui lui Fleming, Robert) a fost internat la Spitalul St Mary din cauza infecției sistemului nervos care pune viața în pericol (meningită streptococică)., Fleming la tratat cu sulfonamide, dar starea lui Lambert sa deteriorat. El a testat sensibilitatea la antibiotice și a constatat că penicilina lui ar putea ucide bacteriile. El a cerut Florey pentru proba izolat. Când Florey a trimis proba incomplet purificată, pe care Fleming i-a administrat-o imediat în canalul spinal al lui Lambert. Lambert a prezentat semne de îmbunătățire chiar a doua zi și sa recuperat complet într-o săptămână. Fleming a publicat cazul clinic în The Lancet în 1943.,la această descoperire medicală, Allison a informat Ministerul britanic al Sănătății despre importanța penicilinei și necesitatea producției în masă. Cabinetul de război a fost convins de utilitatea pe care Sir Cecil Weir, Directorul General al echipamentului, a cerut o întâlnire cu privire la modul de acțiune la 28 septembrie 1942. Comitetul pentru penicilină a fost creat la 5 aprilie 1943. Comitetul a constat din Weir ca președinte, Fleming, Florey, Sir Percival Hartley, Allison și reprezentanți ai companiilor farmaceutice ca membri., Principalele obiective au fost producerea rapidă a penicilinei în cantități mari cu colaborarea companiilor americane și furnizarea medicamentului exclusiv pentru forțele armate aliate. Până în ziua Z, în 1944, a fost produsă suficientă penicilină pentru a trata toți răniții trupelor aliate.

rezistența la antibiotice