Este ensaio demonstra a presença de catalase, uma enzima que catalisa a libertação de oxigénio do peróxido de hidrogénio (H2O2). É usado para diferenciar as bactérias que produzem uma catalase enzimática, como staphylococci, de bactérias que não produzem catalase, como streptococci. Normalmente 3% H2O2 é usado para a cultura de rotina, enquanto 15% H2O2 é usado para a detecção de catalase em anaeróbios.,
princípio do ensaio da Catalase
a enzima catalase mediata a degradação do peróxido de hidrogénio em oxigénio e água. A presença da enzima num isolado bacteriano é evidente quando um pequeno inóculo é introduzido no peróxido de hidrogénio, e a rápida elaboração de bolhas de oxigénio ocorre. A falta de catalase é evidente pela falta de ou fraca produção de bolhas. A cultura não deve ter mais de 24 horas.,
bactérias protegem-se assim do efeito letal do peróxido de hidrogénio, que é acumulado como um produto final do metabolismo aeróbico dos hidratos de carbono.
objectivo ou utilizações do teste da Catalase
- O Enterococusor Streptococcus morfologicamente semelhante (negativo da catalase) e Staphylococcus (positivo da catalase) podem ser diferenciados utilizando o teste da catalase.
- Também é valioso na diferenciação de bactérias aeróbias e anaeróbias.o teste da catalase semiquantitativa é utilizado para a identificação do Mycobacterium tuberculosis.,é utilizado para diferenciar estirpes aerotolerantes de Clostridium, que são catalase negativas, das espécies de Bacillus, que são positivas.
- Catalase test can be used as an aid to the identification of Enterobacteriaceae.procedimento de ensaio da Catalase: colocar 1-2 ml de solução de peróxido de hidrogénio num tubo de ensaio.utilizando uma varinha de madeira estéril ou uma vareta de vidro, tomar várias colónias do organismo de ensaio de 18 a 24 horas e imergir na solução de peróxido de hidrogénio.Observe para bolhas imediatas.,método de lâmina
- Use um lacete ou um pau de madeira estéril para transferir uma pequena quantidade de crescimento de colónias na superfície de uma lâmina de vidro limpa e seca.colocar uma gota de 3% de H2O2 na lâmina de vidro.Observe a evolução das bolhas de oxigénio.
- Os organismos de teste não deve ser tomado a partir de agar de sangue e de cultura., Os glóbulos vermelhos contêm catalase e a sua presença dará um teste falso positivo.a cultura deve ter 18 a 24 horas de idade.o peróxido de hidrogénio deve ser fresco, uma vez que é muito instável.não se deve utilizar laço de ferro.
- algumas bactérias produzem uma peroxidase que catalisa uma degradação do peróxido de hidrogénio, fazendo com que a reacção seja fracamente positiva; (algumas bolhas elaboradas lentamente). Isto não deve ser confundido com uma reacção verdadeiramente positiva.não adicionar organismo ao reagente, particularmente se forem utilizados laços de inoculação contendo ferro., Os laços contendo ferro causarão resultados falsos positivos no teste se expostos a peróxido de hidrogénio.
a Interpretação dos resultados do Teste de Catalase e Exemplos
a Interpretação dos resultados do Teste de Catalase e Exemplos
Positivo: Grandes bolhas produzidas, active borbulhando
Exemplos: Estafilococos, Micrococci, Listeria, Corynebacterium diphtheriae, Burkholderia cepacia, Nocardia, a família Enterobacteriaceae (Citrobacter, E., coli, Enterobacter, Klebsiella, Shigella, Yersinia, Proteus, Salmonella, Serratia), Pseudomonas, Mycobacterium tuberculosis, Aspergillus, Cryptococcus, and Rhodococcus equi.negativo: não ou foram produzidas poucas bolhas.
Exemplos: Streptococcus e Enterococcus spp
Controle de Qualidade de Catalase Teste
Positivos: Staphylococcus aureus– ATCC 33592
Negativo: Enterococcus faecalis– ATCC 29212