liczenie komórek Hemocytometrem

hemocytometr jest podzielony na 9 głównych kwadratów o wymiarach 1mm x 1mm. Cztery kwadraty conera (oznaczone czerwonym kwadratem) są dalej podzielone na 4 x 4 siatki. Wysokość Komory uformowanej ze szkła osłonowego wynosi 0,1 mm, więc komora 1 mm x 1 mm x 0,1 mm ma objętość 0,1 mm3 lub 10-4 ml.

aby policzyć komórki za pomocą hemocytometru, dodaj 15-20µl zawiesiny komórkowej między hemocytometrem i przykryj szkło za pomocą Pipetmana P-20., Celem jest mieć około 100-200 komórek/kwadrat. Policz liczbę komórek we wszystkich czterech zewnętrznych kwadratach podziel przez cztery (średnia liczba komórek / kwadrat). Liczba komórek na kwadrat x 104 = liczba komórek/ml zawiesiny. Protokół ten działa dobrze zarówno dla przylegających komórek ssaków, które zostały trypsynizowane lub dla komórek zawiesinowych, w tym Sf9 komórek owadów. Czerwone krwinki są zazwyczaj zbyt małe i liczne dla tego protokołu i wykorzystują zamiast tego środkowy kwadrat.

Po zakończeniu spryskać hemocytometr i pokryć poślizg 70% etanolem, aby zabić komórki., Umyć obie wodą dejonizowaną i wytrzeć do sucha Kimwipe. Zawiń czystą Kimwipe i wróć do schowka. Uwaga, pokrywy hemocytomeru wykonane są ze specjalnego grubszego / bardziej płaskiego szkła. Staraj się unikać złamania lub zgubienia go. Jeśli to zrobisz, Zmień kolejność pokrywy hemocytomerów, a nie zwykłych pokryw.

Dodaj komentarz

Twój adres email nie zostanie opublikowany. Pola, których wypełnienie jest wymagane, są oznaczone symbolem *