Etter å ha studert på RADA fra 1992 til 1995, Macfadyen ble kjent i Britisk teater først og fremst for sitt arbeid med den fasen selskapet Kinnet av Underkjeve, for som han spilte Antonio i Hertuginnen av Malfi, Charles Overflaten i Skolen for Skandalen, og Benedick i Mye Ståhei Om Ingenting. Hans Benedick ble spilt som en offiser-klasse gjøgler med bart og skrøt til å le. I 2005 spilte han Prins Hal i Henry IV, Deler Én og To på Royal National Theatre, med Michael Gambon i rollen som Falstaff., I 2007 kom han tilbake til scenen, portretterer en Amerikansk, Leire, en stay-at-home far med en liberal holdning i spille Smerte og Kløe.

EN TV gjennombrudd kom da han dukket opp som Hareton Earnshaw i en tilpasning av Stormfulle Høyder, vist på ITV-nettverket i 1998. Mer tv-drama arbeidet følges, inkludert skuespillere roller i serier Krigere (1999) og Måten Vi Lever På Nå (2001), både for BBC. Også i 2001, fikk han anerkjennelse for sin hovedrolle i BBC To drama seriell Perfekt Fremmede, som var skrevet og regissert av Stephen Poliakoff., I 2002 spilte han i Prosjektet, en BBC drama kartlegging Nye Labour ‘ s vei til makten. Han spilte i Spooks, som ble en suksess når vist på BBC One. En lenger andre sesong ble vist i 2003, og en tredje sesong ble sendt høsten 2004, med ham å forlate serien i den andre episoden. Serien ble vist som MI-5 på En&E-Nettverket. I 2007 dukket han opp i en av Channel 4 drama Hemmelige Liv, som jobbet med det kontroversielle temaet pedofili., Macfadyen vant prisen for Beste Skuespiller prisen på Royal Television Society 2007 Awards for denne delen, og ble nominert til en BAFTA. Han dukket også opp i en kort skisse for Comic Relief som brudgom i Mr. Bean ‘ s Bryllup, sammen med Rowan Atkinson og Michelle Ryan.

Macfadyen dukket opp i filmer, inkludert Enigma (utgitt i 2001), og I Far Min ‘ s Den, for som han mottok New Zealand Screen Award for Beste Skuespiller., Han spilte rollen som den romantiske føre Fitzwilliam Darcy i en tilpasning av Stolthet og Fordom, som ble lansert i NORGE i September 2005.

Macfadyen spilte i Frank Oz ‘ s Death at a Funeral og filmen Brannbomber, basert på Chris Cleave roman sammen med Michelle Williams og Ewan McGregor. Han dukket også opp i Ron Howards film Frost/Nixon, der han spilte John Birt. I 2008 spilte han den mannlige føre Arthur Clennam i BBCS filmatisering av Charles Dickens » Little Dorrit., I 2009 Macfadyen dukket opp sammen med oscar-nominert skuespiller Helena Bonham Carter i BBC Fire filmen Enid, basert på livet til Enid Blyton, som Hugh Pollock, Blyton er utgiver og første mann.

I 2010, spilte han Sheriffen av Nottingham i Robin Hood. Han spilte som Før Filip i TV seriell The Pillars of the Earth, og var den middelaldrende Logan Mountstuart i Alle Menneskelige Hjertet. I juni 2010, Macfadyen vant British Academy Television Award for Beste mannlige Skuespiller for sitt arbeid i strafferett.,

I 2011, Macfadyen gjort et endelig cameo i BBC viser Spooks, og i 2012 spilte han Oblonsky i Joe Wright ‘ s film, Anna Karenina. I desember 2012 begynte han skildrer Detektiv Inspektør Edmund Reid i BBC One Ripper Street.

I 2013-14 han spilte Jeeves i produksjonen av Jeeves og Wooster i Perfekt Tull på Duke of York ‘ s Teater i West End i London. Spille vant 2014 Olivier award for Beste Nye Komedie.

I 2015 Amazon Prime plukket opp Ripper Street, og etter gode anmeldelser, var recommissioned for fjerde og femte sesonger., Macfadyen sa at han var «glad for å bli fatt på en ny dose av Ripper Street – blod og innvoller, pocket klokker og Viktoriansk hodeplagg, fantastisk mørk, flytte og mystiske historier fra Mr Richard Wardlow». Serien også ble sendt i USA på BBC America. Også i 2015, han gjest spilte i den første episoden av Den Siste Riket.

Han er i dag stjerner som Tom Wambsgans i HBO-serien Rad, som han mottok en Primetime Emmy Award-nominasjon.,

I 2020, han dukket opp i rollen som Major Charles Ingram i en tre-del ITV drama, Quiz, basert på den kontroversielle hoste jukse-skandalen på hvem Som Ønsker Å Være en Millionær i 2001.