Denne testen viser tilstedeværelsen av catalase, et enzym som catalyses utgivelsen av oksygen fra hydrogenperoksid (H2O2). Den brukes til å skille de bakterier som produserer et enzym catalase, for eksempel stafylokokker, fra ikke-catalase produserende bakterier som streptokokker. Normalt 3% H2O2 er brukt til rutine kultur mens 15% H2O2 er brukt for påvisning av catalase i anaerober.,
Prinsippet om Catalase Test
enzymet catalase formidler nedbryting av hydrogenperoksid til oksygen og vann. Tilstedeværelsen av enzymet i en bakteriell isolere er tydelig når en liten inokulatet er introdusert i hydrogen peroxide, og den raske utviklingen av oksygen bobler oppstår. Mangel på catalase er tydelig ved manglende eller svak boble produksjon. Kultur skal ikke være mer enn 24 timer gamle.,
Bakterier og dermed beskytte seg mot den dødelige effekten av hydrogenperoksid som er fremkommet som et sluttprodukt av aerobic karbohydrat metabolismen.
Formål eller Bruker av Catalase Test
- morphologically lignende Enterococcusor-Streptokokker (catalase negativ) og Staphylococcus (catalase positive) kan være differensiert med catalase test.
- Også verdifulle i å skille aerobic og obligate anaerobe bakterier.
- Kvantitativ catalase test brukes for identifisering av Mycobacterium tuberculosis.,
- Det er brukt for å skille aerotolerant stammer av Clostridium, som er catalase negative, fra Bacillus-arter, som er positive.
- Catalase test kan brukes som en hjelp til identifisering av Enterobacteriaceae.
Prosedyre for Catalase Test
- Hell 1-2 ml hydrogenperoksid løsningen i et reagensglass.
- ved Hjelp av en steril trepinne eller et glass stang, ta flere kolonier av 18 til 24 timer test organismen og fordype seg i den hydrogen peroxide løsning.
- Observer for umiddelbar boblende.,
Skyv Metode
- Bruk en løkke eller sterilt trepinne til å overføre en liten del av kolonien vekst i overflaten av et rent, tørt glass-slide.
- Sted en nedgang på 3% H2O2 i glass-slide.
- Observer for utviklingen av oksygen bobler.
Resultat Tolkning av Catalase Test og Eksempler på
Positive: Store bobler produsert, aktiv boblende
Eksempler: Stafylokokker, Micrococci, Listeria, Corynebacterium diphtheriae, Burkholderia cepacia, Nocardia, familien Enterobacteriaceae (Citrobacter, E., coli, Enterobacter, Klebsiella, Shigella, Yersinia, Proteus, Salmonella, Serratia), Pseudomonas, Mycobacterium tuberculosis, Aspergillus, Cryptococcus, og Rhodococcus equi.
Negative: Ingen eller svært få bobler produsert.
Eksempler: – Streptokokker og Enterococcus spp
kvalitetskontroll av Catalase Test
Positive: Staphylococcus aureus– ATCC 33592
Negative: Enterococcus faecalis– ATCC 29212
Forsiktighetsregler av Catalase Test
- testen organismer skal ikke være tatt fra blod agar kultur., Røde Blod celler inneholder catalase og deres tilstedeværelse vil gi en falsk positiv test.
- Kultur bør være 18 til 24 timer gamle.
- Hydrogen peroxide må være frisk som det er svært ustabil.
- Strykejern wire loop bør ikke brukes.
- Noen bakterier produserer en peroksidase som catalyzes et sammenbrudd av hydrogen peroxide forårsaker reaksjon å være svakt positiv; (noen bobler utarbeidet sakte). Dette må ikke forveksles med en virkelig positiv reaksjon.
- ikke legg organisme til reagens, spesielt hvis jern-holdige inoculating looper er brukt., Strykejern inneholder looper vil føre til falske positive testresultater hvis den er utsatt for hydrogen peroxide.