antiglobulin, eller Coombs test er en del av kompatibilitet tester at enhver pasient som vil motta en rød blodceller transfusjon må gjennomgå. Denne testen er også viktig i det diagnostiske arbeidet med pasienter med anemi hvis opprinnelse er ikke enkelt bestemt og når etiologi må identifiseres nøyaktig.

I 1945, Robin Coombs, Arthur Mourant og Rob Rase beskrevet en test for å påvise anti-Rho (anti-D) ikke-agglutinant antistoffer.,1 Opprinnelig testen ble utviklet av Robin Coombs som en del av sin videreutdanning på Rase og Mourant er laboratoriet i Cambridge, England i 1945. Hans mål var å studere egenskapene til antistoffer som er involvert i sammenheng med det som ble kjent som fosterets erythroblastosis, som nå er kjent som hemolytisk sykdom hos nyfødte (HDN), forårsaket mest av inkompatibilitet mellom en Rh-negativ mor sensibilisert under en tidligere graviditet, som produserer IgG anti-D antistoffer i stand til å passere morkaken barriere på grunn av sin lille størrelse som da dekke fosterets røde blodlegemer., Disse er senere phagocytosed i milten og leveren, organer, som i tillegg til sine andre funksjoner, opprettholde extramedullary hematopoiesis i fosteret, for å kompensere for anemi som følge av hemolyse. Senere, Coombs-test ble brukt for å demonstrere tilstedeværelse av ufullstendige antistoffer som dekket erytrocytter i vivo, som er sett i tilfeller av autoimmun hemolytisk anemi (AHA). Beskrivelse av metoden og dens anvendelse i ulike hematological sykdommer, som ble publisert i The Lancet og British Journal of Eksperimentell Patologi i 1945 og 1946, henholdsvis.,2

prinsippene i antiglobulin test er som følger: når immunglobuliner av IgG-klasse (gamma globulin) og komplement (beta globulin) av human opprinnelse er injisert inn i ulike kaniner, de produserer IgG-antistoffer mot disse globuliner, som senere blandet i laboratoriet for å produsere et bredt spekter Coombs reagens som brukes i daglig blod bank praksis., Den kanin IgG antiglobulin molekyler fungere som en bro, som forener de ufullstendige IgG-antistoffer som dekker tilstøtende røde blod celler, forårsaker agglutinasjon og visualisering av reaksjon for det blotte øyet, noe som kan sees i et reagensglass eller gel-kort, tolkes som en positiv Coombs test.

Det er to varianter av denne testen. Når det er ansatt for å påvise antistoffer bundet til erytrocytter in vivo-det er kjent som en direkte antiglobulin test eller direkte Coombs test., På den annen side, når antiglobulin brukes til å oppdage tilstedeværelsen in vitro av gratis antistoffer i serum etter inkubering i Coombs fase av cross match, det er kjent som en indirekte antiglobulin test, eller en indirekte Coombs test. Denne varianten av testen er den som er brukt i påvisning av anti-D antistoffer i mors serum av kvinner som er D-antigen negative, så vel som søk etter og påvisning av antistoffer i serum når et panel av kommersielle erytrocytter, som fenotypen er kjent, er ansatt.,3,4

ApplicationsThe direkte Coombs test

• I forbindelse med undersøkelse av antistoffer, slik som de i pasienter med autoimmun hemolytisk anemi.

• I etterforskningen av alloantibodies, slik som hos nyfødte lidelse hemolytisk sykdom hos nyfødte.

• for Å dokumentere en hemolytisk transfusjon reaksjon.

Den indirekte Coombs test

• I deteksjon av irregulære antistoffer i pasientens serum.

• I fastsettelse av røde blodlegemer phenotypes.

• Som en del av kryssmatching-test.,

Manuelle og automatiske metoder for Coombs test

Disse kan bli vurdert, generelt: (1) test tube teknikker, som var tradisjonelle og er nå praktisk talt ubrukt, (2) mikroplate teknikker, og (3) agglutinasjon teknikker i gel kolonner. Den faste fasen metoder (gel, glassperler og microplates) dukket opp på 90-tallet og har sett generalisert bruk i Mexico siden år 2000. Foreløpig er den mest brukte teknikken er at av kort med gel kolonner.

Gel-test

I 1990, Lapierre utviklet et system av gel tester.,5 Disse var basert på bruk av dextran akrylamid gel partikler, en gel matrise som fungerte som et filter, stopper agglutinated røde blod celler fra å passere gjennom, og dermed fanger red blod celler på overflaten av gel i henhold til deres størrelse, noe som utgjør en positiv test. En negativ reaksjon former en knapp av ikke-agglutinated red blod celler på bunnen av microtube., Gel-kortet inneholder 6 microtubes, som gjør det mulig for fastsettelse av 6 forskjellige antigener og antistoffer, vanligvis ABO-blodtype (direkte og omvendt) og Rh (D-antigen), kompatibilitet tester, og Coombs test. Disse testene kan utføres manuelt eller automatisk.,5

Blant de fordeler med automatisering er følgende: et større antall prøver kan analyseres, vasket erytrocytter er ikke nødvendig, presisjon og reproduserbarhet er forbedret, subjektivitet i tolkningen av resultatene er eliminert, kan resultatene bli bevart for timer, og manuell arbeidskraft er redusert, minimere risiko for feil i ulike faser av testen.

direkte Coombs test

Når den direkte antiglobulin testen er positiv, betyr dette at ufullstendige IgG-antistoffer eller fragmenter av komplement (spesielt C3d), er til stede, på erytrocytter., På den annen side, når det er ingen agglutinasjon (en negativ test), disse antistoffene er ikke til stede på erytrocytter’ overflate (Fig. 1).6

– >

En negativ direkte Coombs test betyr ikke nødvendigvis at det ikke er noen ufullstendige antistoffer på den røde blod celler, siden den vanlige reagenser for menneskelig polyspecific antiglobulins, som er i daglig bruk i blodet banker, reagerer kun når det er minst 200 IgG-molekyler eller mer per erytrocytt. På samme måte, hvis antistoff involvert er en IgA, som i noen tilfeller av autoimmun hemolytisk anemi, testen vil være negativt, siden standarden Coombs reagens ikke inneholder anti-IgA-antistoffer.,7,8

Den indirekte Coombs test

Den indirekte menneskelige antiglobulin testen er positiv når det er gratis IgG-antistoffer i serum, som er tilfellet med hemolytisk sykdom hos nyfødte, testen er også rutinemessig brukes for identifisering av uregelmessig (uventet) antistoffer ansette en kommersiell panel av røde blod celler (Fig. 1).,6

I konklusjonen, siden dens introduksjon til klinisk laboratorium 70 år siden, Coombs test har utviklet seg teknisk og dens prinsipper fortsette å være gjeldende i dag, noe som gjør dette til en enkel og økonomisk test en av de mest allsidige og viktig som brukes i diagnostisering av hematological sykdommer, og i trygg praksis av transfusjon medisin.

Midler

Ingen økonomisk støtte ble gitt.

interessekonflikt

forfatterne har ingen interessekonflikter for å forkynne.