혈구계로 셀 카운팅

혈구계는 1mm x1mm 크기의 9 개의 주요 사각형으로 나뉩니다. 4 개의 coner 사각형(빨간색 사각형으로 식별 됨)은 4×4 격자로 더 세분화됩니다. 고도의 약실을 형성을 가진 커버 유리가 0.1mm,그래서는 1mm x1mm x0.1mm 상공 회의소는 볼륨의 0.1mm3 또는 10-4ml.

혈구계를 사용하여 세포를 카운트하려면 P-20 피펫 맨을 사용하여 혈구계와 커버 유리 사이에 15-20μl 의 세포 현탁액을 첨가하십시오., 목표는 대략 100-200 셀/정사각형을 갖는 것입니다. 네 개의 외부 사각형에서 셀 수를 4 로 나눕니다(평균 셀 수/사각형). 제곱 당 셀 수 x104=현탁액의 셀 수/ml. 이 프로토콜은 트립신 화 된 부착 포유 동물 세포 또는 Sf9 곤충 세포를 포함한 현탁 세포에 대해 잘 작동합니다. 적혈구는 일반적으로이 프로토콜에 대해 너무 작고 많으며 대신 중간 사각형을 활용합니다.

완료되면 혈구계를 스프레이하고 70%에탄올로 슬립을 덮어 세포를 죽입니다., 둘 다 탈 이온수로 세척하고 킴 위프로 물기를 닦아냅니다. 깨끗한 킴위프에 싸서 보관함으로 돌아갑니다. 참고,hemocytomer 에 대한 커버 슬립은 특별한 두꺼운/평평한 유리로 만들어집니다. 깨지거나 잃어 버리지 않도록 노력하십시오. 그럴 경우 일반 커버 슬립이 아닌 헤모 사이토 머 커버 슬립을 재정렬하십시오.

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