유전 사이의 연결을 DNA 복구 경로와 인간의 암 경향이 관심 연료에는 단백질을 인정하고 수리하는 특정 사이트의 DNA 손상합니다. 복구 효소가 현저하게 보존에서는 박테리아를 곰팡이 인간에게 강조하는 프리미엄 위치에 유지하는 게놈 무결성에 직면의 돌연 변이 부담이 있습니다., DNA 는 복제 중에 저지른 오류와 방사선,산화제 또는 알킬화제와 같은 환경 요인에 의해 야기되는 손상에 취약합니다. 수리 반응은 DNA 듀플렉스로부터 화학적으로 변화되거나 잘못 변형 된 염기의 절제를 포함한다. 결과로 생긴 틈새는 DNA 중합 효소에 의해 채워진다;이 반응은 수리 부위에서 또는 측면으로 닉을 남깁니다. 유사한 프로세스 동안 발생하는 염색체의 DNA 복제,그것에 의하여 5′-RNA 의 세그먼트는 주요 불연속의 합성 Okazaki fragments 는 절제하고,중간에 견고한 기초를 제공하여 DNA polymerase.,

DNA repair 복제 및 경로에 수렴 일반적인 최종 단계에서의 연속성 수리 DNA 복원하여 DNA 리가,변환 하는 효소 흠로 phosphodiester 수 있습니다. Nicks 는 잠재적으로 해로운 DNA 병변으로,수정되지 않으면 치명적인 이중 가닥 파손을 유발할 수 있습니다. 따라서,DNA 리가 제 기능의 총 손실은 치명적이다.

DNA 리가 반응

DNA ligases 촉매의 결 5′-인산-terminated 가닥을 3′-hydroxyl 종료시킵니다., 결찰은 마그네슘과 ATP 또는 NAD+중 고 에너지 보조 인자에 달려 있습니다. 반응 메카니즘은 3 개의 순차적 뉴클레오티딜 전달 반응을 포함한다. 첫 번째 단계에서,친핵 공격에 알파-인 ATP(삼인산 아데노신)또는 나트+(니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드)의 리가에서 피로인산나 NMN(니코틴아미드 mononucleotide)형성과의 공유결합급(리가-adenylate)에서는 AMP 를 통해 연결된 phosphoamide(P-N)채권을 입실론-아미노 그룹의 리진., 두 번째 단계에서,AMP 는 5′-인산염-종결 된 DNA 가닥의 5′-말단으로 옮겨져 DNA-아데 닐 레이트—반전 된 피로 포스페이트 다리 구조,AppN 을 형성한다. 이 반응에서,DNA 가닥의 5′-인산염 산소는 리가 제-아데 닐 레이트의 인을 공격한다;활성 부위 라이신 측쇄는 떠나는 그룹이다. 세 번째 단계에서,리가 제는 DNA-아데 닐 레이트상의 닉의 3′-OH 에 의한 공격을 촉매하여 2 개의 폴리 뉴클레오티드에 합류하고 AMP 를 해방시킨다.

계통 발생 분포

살아있는 유기체는 eubacteria,archaeabacteria 및 진핵 생물의 3 가지 도메인을 포함한다., 모든 유기체는 1 개 이상의 DNA 리가 제를 암호화합니다. 리가 제는 리가 제-아데 닐 레이트 형성에 필요한 뉴클레오타이드 기질에 따라 ATP 의존성 리가 제 및 NAD+의존성 리가 제 2 계열로 그룹화된다. ATP 의존성 DNA 리가 제는 3 개 도메인 모두에서 발견됩니다. NAD+의존성 DNA 리가 제(LigA)는 박테리아에 편재되어 있으며,여기서 그들은 성장에 필수적이며 항 감염 약물 발견을위한 매력적인 표적을 제시합니다. NAD+의존성 리가 제는 예를 들어 생명체의 박테리아 영역 밖에서 산발적으로 만 발생합니다,,halophilic archaea 및 특정 DNA 바이러스에서,그리고 아마도 수평 유전자 전달에 의해 이들 분류군에서 획득되었다.

진핵 세포 ATP 의존성 리가 제

ATP 의존성 DNA 리가 제는 모든 진핵 생물 종에서 발견된다. 포유류 세포는 4 개의 DNA 리가 제 이소 자임을 함유하고 있습니다. 아미노산 시퀀스에 비교하는 것이 좋 핵심 촉매 도메인의 일반적인 모든 ATP-dependent ligases 이 장식에 의해 추가적인 동질 효소-특정 도메인에 있는 아미노나 테르 미니 카르복실기의 단백질이다., 그것은 생각이 이러한 측면에 서 세그먼트는 중재 바인딩의 포유류 DNA ligases 다른 단백질 DNA 복제에 관여,수리,재조합. 포유류의 동위 효소를 이라고 리가 나는,리가 IIIa,리가 IIIb 및 리가 IV. DNA 리가 나가 919-amino acid 폴리펩타이드,표현되는 모든 조직에서는 촉매의 결합 Okazaki fragments during DNA 복제의 역할을 DNA 복구합니다., DNA ligases IIIa(922 아미노산)및 IIIb(862 아미노산)제품은 하나의 유전자는,그들과 다를 아미노산 시퀀스에서만 자신의 카르복실기 로마의 결과로 대체 mRNA 접합. Ligase IIIa 는 편재적으로 발현되며 DNA 수리에 연루되어 미토콘드리아 기능에 필수적입니다. 리가 제 IIIb 발현은 고환,특히 감수 분열을 겪는 정자 세포로 제한됩니다. DNA 리가 제 IV 는 비 동종 말단 결합(NHEJ)을 통해 이중 가닥 DNA 파단의 수리에 역할을하는 911 아미노산 폴리펩티드입니다.,

효모 세포는 각각 포유류 DNA 리가 제 I 및 IV 와 동종 인 2 개의 개별적으로 인코딩 된 DNA 리가 제를 함유한다. 신진 효모 Saccharomyces cerevisiae 의 DNA 리가 제 I(Cdc9p)는 세포 성장에 필수적입니다. 유전자 실험은 오카자키 조각을 봉인하고 DNA 절제 수리의 완료에 리가 제 I 를 연루시킨다. 대조적으로,효모 DNA 리가 제 IV 는 세포 성장에 필수적이지 않다. 그러나,LIG4 유전자의 삭제는 ligase IV 가 비 동종 말단 결합 경로(NHEJ)에서 이중 가닥 파단의 수리를 촉매한다는 것을 나타내는 표현형을 유도한다., 신진 효모 없는 명백한 homologue 의 포유류 DNA 리가 III.

바이러스 ATP-Dependent DNA Ligases

세균의 DNA 바이러스와 같은 대장균 박테리오파 T4,T6,T7 및 T3,인코딩이 자신의 ATP-dependent DNA ligases. ATP 의존성 DNA 리가 제는 또한 세포질에서 복제주기의 일부 또는 전부를 수행하는 진핵 생물 DNA 바이러스에 의해 암호화된다. 여기에는 vaccinia 바이러스,아프리카 돼지 열병 바이러스 및 클로렐라 바이러스 PBCV1 이 포함됩니다. 박테리오파지 및 진핵 생물 바이러스 DNA 리가 제는 세포 대응 물보다 작다., Vaccinia DNA 리가,a552-아미노산 폴리펩타이드,은 매우 비슷하에서 아미노산 시퀀스 수준을 포유류 DNA 리가 III. 실제로,III 리가 더욱 밀접하게 관련 vaccinia 리가하는 것보다 포유류 ligases 가 및 IV. 이 ligases T4(487 아미노산),T7(359 아미노산),T3(346 아미노산),클로렐라 바이러스(298 아미노산)에 있는 작은 여전히있다. 우리는 클로렐라 바이러스 리가 제가 DNA 리가 제 I 유전자가 삭제 된 효모 균주의 성장을 보완 할 수 있음을 보여주었습니다., 이 결과는 훨씬 더 큰 DNA 리가 제 I 에 고유 한 단백질 세그먼트가 효모 세포 성장에 필수적이지 않다는 것을 시사한다.

닉 감지하여 DNA Ligases

우리는 검사용의 진 핵 ligases DNA 를 사용하여 바이러스 로 인코딩된 효소로는 모델입니다. Vaccinia 바이러스의 DNA 리가와 클로렐라 바이러스의 DNA 리가 각각 분산으로 단독으로 다 DNA 리간드의 부재에서 마그네슘 해결될 수 있는 무료 DNA 의 기본 폴리아크릴아미드 겔 전기 영동법입니다., 바이러스 ligases 을 형성하지 않는 안정적인 단지는 다음과 같은 ligands:(i)DNA 를 포함하는 1-뉴클레오티드 또는 2-뉴클레오티드 갭;(ii)밀봉된 이중 DNA 는 제품의 내응;(iii)가 단독으로 흠집중 포함된 5′-OH 말단에서 닉 대신 5′-인산,또는(iv)단독으로 흠집중 포함된 RNA 의 가닥에서 5′-인산의 측면 닉(10~15). 따라서,바이러스 ATP 의존성 DNA 리가 제는 본질적인 닉 감지 기능을 갖는다.,

닉 인식 vaccinia DNA 리가와 클로렐라 바이러스의 DNA 리가에 따라 달라의 인 AMP 바인딩을 주머니에서 효소,즉,돌연변이의 이 리가 현재 사이트는 폐지는 능력을 형성한 리가-adenylate 중급도 제거 닉 인식이며 돌연변이 유지되는 리가-adenylate 형성이나 다운스트림 오브젝트의 단계는 스트랜드 결합 반응이 없 효과에 바인딩하여 긁어 DNA., 의 격리는 extrahelical 뉴클레오티드 DNA-bound 리가의 연상의”base-내리고”메커니즘의 대상 사이트로 인식하고 촉매에 사용하는 다 DNA 수정하고 수리하고 건강한데 주목했습니다.

5′-포스페이트 모이어티는 nicked DNA 에 클로렐라 바이러스 리가 아제의 결합에 필수적이지만,3′-OH 모이어티는 nick 인식에 필요하지 않다. 클로렐라 바이러스 리가 결합하여 긁어 리간드가 포함된 2′,3’dideoxy 및 5′-phosphate termini 지 않을 촉진 adenylation 의 5′-end., 따라서,3′-OH 는 dna-아데 닐 레이트 형성 동안 그 자체가 화학적으로 변형되지 않더라도 2 단계 화학에 중요하다.

리가 제-DNA 계면을 묘사하기 위해,우리는 dna 상에 리가 제 결합 부위를 풋 프린트했다. 듀플렉스 DNA 에서 단일 닉에 결합 된 리가 제의 엑소 뉴 클레아 제 III 발자국의 크기는 19 내지 21 개의 뉴클레오타이드이다. 발자국은 비대칭이며 닉의 3′-OH 쪽에서 8~9 개의 뉴클레오타이드와 5′-인산염 쪽에서 11~12 개의 뉴클레오타이드를 확장합니다.,

크리스탈 구조물의 진 핵 DNA 리가-Adenylate

클로렐라 바이러스의 DNA 리가(ChVLig)는 가장 핵 ATP-dependent 리가로 알려져 있습니다. “최소”DNA 리가 제로서,구조 결정을위한 매력적인 표적을 제시했다. 우리는 ChVLig 를 결정화하고 2Å 해상도로 구조를 결정했습니다. 효소는 더 큰 N-말단 뉴클레오티딜 트랜스퍼 라제(NTase)도메인과 그 사이에 갈라진 틈이있는 더 작은 C-말단 OB 도메인으로 구성됩니다. AMP 모이어티는 활성 부위에서 Lys27 의 Nz 와 공유 결합되었다., 따라서 우리는 진정한 촉매 중간체의 구조를 가지고 있습니다.

내 NTase 도메인은 adenylate binding pocket 로 구성되어의 펩타이드 모티프(I,Ia,III,IIIa,IV,V)을 정의하는 공유결합 nucleotidyltransferase 효소 superfamily 포함한 DNA 및 RNA ligases 및 mRNA 모자를 씌우는 효소입니다. 모티프 I(KxDGxR)는 리가 제 반응의 첫 번째 단계에서 AMP 가 공유 결합되는 라이신을 함유한다. 모티프 ia,III,IIIa,IV 및 V 의 아미노산은 AMP 와 접촉하고 결찰 경로의 하나 이상의 단계에서 필수적인 역할을합니다., OB 도메인은 5 가닥 antiparallel 베타 배럴과 알파 나선으로 구성됩니다.

구조적으로 닉 인정한 최소한의”만능”DNA 리가

지만 ChVLig 이 부족은 큰 N-또는 C-terminal 도메인 측면에서 찾을 진핵 세포의 DNA ligases,그것을 유지할 수 있 mitotic 성장,DNA 복구 및 nonhomologous 끝에 가입하 신진 효모는 때에만 원의 리가에서 휴. ChVLig 는 심지어 미토콘드리아 DNA 대사에서 포유류 Lig3 의 필수 기능을 수행 할 수 있습니다., 우리가 제안하는 ChVLig 나타내 떨어뜨리고”만능”리가 때문에 내장 닉 감지 기능의 기반이 되는 조명 때 우리는 해결 2.3Å 결정 구조의 ChVLig-A 밖에 없 3′-아/5′-PO4 닉에 양면 DNA.

ChVLig 는 DNA 를 C 자형 단백질 클램프로 둘러 쌉니다. NTase 도메인은 nick 을 측면으로하는 주요 그루브 및 nick 의 3′-OH 측면의 마이너 그루브에있는 부서지고 손상되지 않은 DNA 가닥에 결합합니다. 산부인과 도메인은 닉 뒤에 듀플렉스의 얼굴에 작은 홈에 걸쳐 결합., 소설 래치 모듈로 구성되는 베타-머리핀 루프에서 나오는 산부인과 도메인이 차지하는 주요 groove 및 완료주 클램프 연락처를 통해 사이의 끝을 반복하고 표면의 NTase 도메인입니다. 래치는 클램프 클로저에 중요하며 닉 센싱의 핵심 결정 요소입니다.

자유 및 닉 바운드 ChVLig-AMP 의 결정 구조의 비교는 닉 인식을 수반하는 큰 도메인 재 배열을 보여준다., 자유 ChVLig-AMP 에서,Ob 도메인은 NTASE 도메인으로부터 멀리 반사되어 AMP-결합 포켓 위의 DNA-결합 표면을 완전히 노출시킨다. 래치가 될 운명 인 펩타이드 세그먼트는 유리 리가 제에서 무질서하고 단백질 분해에 민감하다. 그러나이 세그먼트는 ChVLig 가 nicked DNA 에 결합 할 때 단백질 분해로부터 보호됩니다. DNA 결합은 ob 베타 배럴의 오목한 표면이 DNA 마이너 홈에 맞도록 회전 주위에 OB 도메인의 거의 180 회전을 수반합니다., 이 전이는 OB 도메인의 63Å 이동을 유도하고 래치를 DNA 메이저 그루브 깊숙히 놓습니다.

활성 부위에서 3′-OH 및 5′-PO4termini 와의 상호 작용 네트워크는 DNA adenylylation 메커니즘과 nick-sensing 및 촉매 작용에서 AMP 의 중요한 역할을 조명했다. 2 가 양이온의 첨가는 crystallo 에서 nick sealing 을 유발하여 NICK 복합체가 DNA 복구 경로에서 선의의 중간체임을 확립했다.,

의 구조 NAD-dependent DNA 리가에 바인딩하여 긁어 DNA-adenylate

NAD-dependent DNA ligases(으로 불가)는 독특하고 구조적으로 균일군의 효소의 발견에서 박테리아. 대장균 리가(671-aa)는이 가족의 프로토 타입입니다. LigA 는 NTase 도메인과 OB 도메인으로 구성된 중앙 ligase 코어를 중심으로 구축 된 모듈 식 아키텍처를 가지고 있습니다. 핵심가에 의해 형벌 N 터미널”Ia”도메인 세 C 터미널 모듈 tetracysteine 아연-손가락,나선-hairpin-helix(HhH)도메인,그리고 BRCT 도메인입니다., 결찰 경로의 각 단계는 모든 단계에 대해서만 NTase 도메인이 필요한 LigA 도메인의 다른 하위 집합에 따라 달라집니다. 도메인 Ia 는 NAD+의존성 리가 제에 고유하며,NAD+의 NMN 모이어 티를 결합시키는 책임이 있으며,nad+와의 반응으로 리가 제-AMP 중간체를 형성하는 데 필요합니다.

우리는 것을 발견 NAD-dependent E.coli DNA 리가의 성장을 지원할 수 있습니다 Saccharomyces cerevisiae 종자 단독으로 삭제한 CDC9 또는 이중에 대한 CDC9plus LIG4., 이것은 NAD+의존성 효소가 진핵 생물에서 생물학적으로 활성이라는 첫 번째 시연이다. 후속 연구(Maria Jasin 과 공동으로)는 대장균 LigA 가 필수 Lig3 효소가 부족한 마우스 ES 세포에서 리가 제 기능에 충분할 수 있음을 보여주었습니다.

nicked DNA-adenylate 중간체에 결합 된 대장균 LigA 의 우리의 결정 구조는 LigA 가 또한 C 형 단백질 클램프로서 DNA 나선을 둘러싸고 있음을 밝혀냈다. 단백질-DNA 계면은 Nick 을 중심으로 한 듀플렉스 DNA 의 19-bp 세그먼트를 통해 NTase,OB 및 HhH 도메인에 의한 광범위한 DNA 접촉을 수반한다., 이 NTase 도메인 결합을 깨 DNA 에서 가닥과 측면 닉,산부인과 도메인의 연락처를 지속적인 템플 스트랜드 주변 닉,HhH 도메인 묶고 두 가닥에서 작은 홈을 주변에서의 발자취입니다. Zn-finger 모듈은 OB 및 HhH 도메인을 브리징하는 데 구조적 역할을합니다. 도메인 Ia 는 AppDNA 기질상의 가닥 폐쇄의 촉매 작용에 대한 분배 성과 일치하는 DNA 듀플렉스에 접촉하지 않는다.,

리가 NTase 및 OB 도메인은 ATP 의존성 DNA ligases 의 NTase 및 OB 도메인과 DNA 둘레에 유사하게 위치하며 DNA 가닥의 유사한 세그먼트를”발자국”합니다. 그러나 리가 클램프의 토폴로지는 ChVLig 와 인간 DNA 리가 제 1(Tom Ellenberger 와 동료들에 의해 결정된 HuLig1)에 의해 형성된 클램프와는 별개로 다르다. 리가 클램프를 닫는 키스 접점은 NTase 도메인과 C-터미널 HhH 도메인을 포함하는 sui generis 입니다., 이용 가능한 구조 데이터에 기초하여,DNA 리가 제는 DNA 를 둘러싸는 적어도 세 가지 다른 수단을 진화 시켰음이 분명하다.

의 비교는 대장균 리가—AppDNA 복잡한 구조의 다른 세균 ligases 캡처로 바이너리 리가•—나트+복잡한(단계 1 기판),이진 리가•—NMN 복잡한(사후 1 단계 떠나는 그룹),그리고 공유 리가-A intermediate(1 단계는 후에 제품 그룹을 떠나는 분리)을 강조는 대규모 단백질 도메인을 재배열(의 순서에 50 90Å)에서 발생하는 동기화 기판으로-바인딩 및 촉매., DNA 바인딩 및 죔쇠를 형성해가 수반 약 180 회전 OB 도메인 오목한 표면의 OB 베타 배럴에 맞는 작은 홈을,본 것과 비슷하거나 추정을 위한 ChVLig 및 HuLig1. LigA-DNA 발자국의 주변부에서 HhH 도메인의 4 점 결합은 nick 을 중심으로 한 DNA 굴곡을 안정화시킨다. 리가-DNA 상호 작용을 즉시 측면 부화명을 유도하는 지역 DNA 왜곡의 결과로 채택 RNA 처럼–나선 형태로,다시을 울리 연구 결과에 대한 HuLig1-DNA cocrystal.,

메커니즘의 lysine adenylylation ATP-dependent 및 NAD-dependent 뉴클레오티드 ligases

자동 adenylylation 의 반응뉴클레오티드 ligases 에 의해 수행됩 nucleotidyltransferase(NTase)도메인을 보존에 ATP-dependent DNA 및 RNA ligases 및 NAD-dependent DNA ligases. NTase 도메인은 뉴클레오티드 결합 포켓을 형성하는 펩티드 모티프를 정의하는 것을 포함한다. 모티프 I(KxDG)는 AMP 에 공유 결합되는 라이신을 함유한다. 로버트 리먼(Robert Lehman)이 1974 년에 지적했듯이,라이신(~10 의 예측 된 pKa 값을 갖는 방법)은 불분명하다.,5)ATP 또는 nad+의 α 인에 대한 공격에 필요한 보호되지 않은 상태를 달성하기 위해 생리 학적 ph 에서 양성자를 잃는다. 원칙적으로,리가 제는 라이신을 탈 프로토 네이트하기 위해 일반적인 염기를 사용할 수있다. 대안 적으로,pKa 는 라이신-Nz 를 둘러싼 단백질 아미노산의 양전하 전위에 의해 구동 될 수있다. 리가제 결석 금속의 몇몇 결정 구조는 어느 하나의 설명에 대한 부족한 지원을 제공했다. 이러한 구조에서 모티프 I 라이신 친핵체는 모티프 IV 글루타메이트 또는 아스파 테이트 측쇄 옆에 위치한다., 리진 및 모티브 IV 카복실산성이온,한 쌍의 기대되는 효과를 증가시키는 것 pKa 의 리진 덕분에 주변의 부정적인 요금입니다. 가능성하는 조미료 또는 아스파르트산염 음이온으로 봉사할 수 있었 일반적인 기본을 추상화하는 양성자에서 리신은 양이온. 이 문제에 대한 잠재적 인 해결책은 2 가 양이온이 라이신-Nz 와 접하고 pKa 를 구동하는 경우 일 것입니다.,

금속 구동 메커니즘에 의해 밝혀졌다 우리의 최근 결정 구조의 Naegleria gruberi RNA 리가(NgrRnl)로 1 단계 미카엘 복잡 ATP 및 망간(선호하는 금속 cofactor). Michaelis 유사 복합체를 포획하는 열쇠는 이소 스테로이드 메티오닌에 의한 라이신 친핵체의 대체였다. 1.9Å 구조는 활성 부위에 ATP 와 2 개의 망간 이온을 함유했다. 는”촉매”금속 조율되었으로 팔면체 형상을 다섯 바다에 돌에 의해 조정 카복실산 측면 체인의 보존된 잔류물에서 모티브 I,III 및 IV., 여섯째 리간드 사이트에서 촉매 금속 복잡한에 의해 점령되었 ATP α 인산염 산소,을 나타내는 역할을위한 금속에서의 안정화의 전환은 국가의 자동 adenylylation 반응입니다. 열쇠 통찰력을 강화하여 중첩의 미카엘이 복잡한 구조에서의 공유결합 NgrRnl-(Lys-뉴질랜드)–A intermediate,우려의 역할을 촉매 금속 복잡한에서 안정 un-protonated 의 상태 lysine 친핵체로 이전 촉매를 통해,지역 긍정적인 충전과 원자의 연락처 리스-뉴질랜드의 금속밖에 없다., NgrRnl Michaelis 복합체는 4 개의 물과 ATP β 및 γ 인산염 옥시겐에 팔면체로 조정 된 두 번째 금속을 밝혀 냈습니다. 금속 복잡하고 ATP γ 인산이었 종사하는 앙상블의 아미노산 측면 체인(독 NgrRnl)는 집단적으로의 방향 PPi 떠나는 그룹의 정점을 lysine 친핵체. 단일 단계 인라인 메커니즘과 일치하여,α 인산염은 ngrrnl•ATP Michaelis 복합체에서 리실–AMP 중간체로의 전이 동안 입체 화학적으로 반전되었다.,

DNA ligases 발전하고 생각이 별도로에서 RNA ligases,처음으로 융합의 조 ATP-활용 NTase 도메인을 C-terminal OB 도메인(을 구성하는 최소한의 촉매의 핵심 DNA 리가)및 그 후의 융합을 통해 추가의 구조적인 모듈을 NTase-OB core(7)입니다. NAD-dependent DNA ligases(리가 효소)있는 유비쿼터스나 박테리아에서와 필수에 대한 세균의 생존 능력,획득한 그들의 특이성을 위해 NAD 융합을 통한의 NMN-바인딩 Ia 도메인 모듈 N-말단의 NTase 도메인입니다., 대장균 DNA 리가(EcoLigA)첫 번째 세포 DNA 리가 발견한 특징 및 그것은 남아 있는 최고의 모델에 대한 구조 및 기능의 연구 NAD-dependent DNA 리가 가족입니다. 관심탈리 메커니즘을 추진하여 약속의 타겟팅을 리가(을 통해 그것의 서명 NAD 기질 특이성과 독특한 구조적 특징 vis à vis 인간의 DNA ligases)에 대한 반대로-세균성 약물을 발견이 있습니다.

우리는 Nad+와 마그네슘을 갖는 Michaelis 복합체로서 EcoLigA 의 1.55Å 결정 구조를 해결했다., 구조 보여 하는 금속 메커니즘에는 리가-바인딩 Mg2+(H2O)5 복잡을 낮추고 lysine pKa 종사 NAD+α 인산지만,β 인산염 및 니코틴아미드의 뉴클레오시드의 NMN 떠나는 그룹의 지향적을 통해 원자와의 상호 작용 단백질 요소에 고유가군. 2 금속(ATP 의존성 리가 아제의 경우)대 1 금속(NAD+의존성 리가 아제의 경우)이분법은 리가 아제 진화에서 분지 점을 구분합니다. 피>