血球計数計による細胞計数

血球計は、9つの1mm x1mmの大きさの主要な正方形に分けられます。 四つのconerの正方形(赤い正方形によって識別される)は、さらに4×4のグリッドに細分化されています。 保護ガラスと形作られる部屋の高さは0.1mmである、従って1つのmm x1つのmm x0.1mmの部屋に0.1mm3か10-4のmlの容積がある。

血球計を用いて細胞を計数するには、P-20ピペットマンを用いて血球計とカバーガラスとの間に15-20μlの細胞懸濁液を添加する。, 目標は、およそ100-200個のセル/正方形を持つことです。 すべての四つの外側の正方形のセルの数を四つで割る(セルの平均数/正方形)を数えます。 平方あたりの細胞数x104=細胞数/懸濁液mlである。 このプロトコルは、トリプシン化された付着性mamm乳類細胞またはSf9昆虫細胞を含む懸濁細胞のいずれかに対して良好に機能する。 赤血球は、通常、このプロトコルのために小さすぎると多数であり、代わりに中央の正方形を利用します。終了したら、hemocytometerに吹きかけ、細胞を殺すために70%のエタノールとスリップをカバーして下さい。, 両方を脱イオン水で洗い、キムワイプで拭き取ってください。 きれいなKimwipeで包み、収納箱に戻りなさい。 Hemocytomerのためのカバースリップは特別でより厚く/平らなガラスの、成っている注いで下さい。 壊れたり紛失したりしないようにしてください。 その場合は、通常のカバースリップではなく、hemocytomerカバースリップを並べ替えます。

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