黄色ブドウ球菌の同一証明:DNaseおよびマンニトールの塩の寒天は管のcoagulaseテストの効率を改善します

Coagulaseのテストは黄色ブドウ球菌を識別するための単一の最も信頼できる方法です。 コアグラーゼの産生は、スライドコアグラーゼ試験(SCT)またはチューブコアグラーゼ試験(TCT)のいずれかを使用して検出することができる。, スライドコアグラーゼは、血漿中のフィブリノゲンと直接反応し、急速な細胞凝集を引き起こす結合したコアグラーゼ(”凝集因子”とも呼ばれる)を検出する。 SCTに続く陰性分離株は,凝集因子を欠損した株は通常遊離コアグラーゼを産生するので,優れたTCTとの確認が必要である。 チューブコアグラーゼは、分泌された細胞外フリーコアグラーゼを検出し、”コアグラーゼ反応因子”(CRF)と呼ばれる血漿中の物質と反応して複合体を形成し、フィブリノゲンと反応してフィブリン(血餅)を形成する。, コアグラーゼ陽性動物ブドウ球菌の株はヒト臨床標本から単離されているが、いくつかの動物ブドウ球菌の分離株はまた、マンニトールを発酵させる。 黄色ぶどう球菌の同定に一般的に使用される表現型法であるTct,DnaseおよびMSAの性能を評価した。

利用可能な表現型試験による黄色ブドウ球菌の検出

ベースライン試験として使用したnuc遺伝子のPCR増幅は、32個の黄色ブドウ球菌を60個のブドウ球菌分離株から検出し、表2を参照してください。, 32nuc陽性の黄色ブドウ球菌の分離株のうち、MSAは分離株の最大数(30の32、94%)を検出し、TCT(それぞれヒトおよびヒツジ血漿)は29および27の分離株(それぞれ91%および84%)を検出した、表2。 DNaseは、分離株の数が最も少ない(24の32、75%)を検出した。

表2Sの識別, nuc遺伝子のPCR検出と比較して一般的なテストと黄色ブドウ球菌

32nuc陽性の黄色ブドウ球菌の分離株(28%)の九は、いくつかの分離株が唯一のテストとしてTCTによって誤認される可能性があることを意味し、コアグラーゼ陰性であった。 コアグラーゼ陰性の黄色ぶどう球菌は,Tctと弱い反応または負に反応すると報告されているMRSA分離株,またはコアグラーゼ陰性であると報告されている稀な黄色ぶどう球菌であると考えられる。 二つの黄色ブドウ球菌の分離株(6%)もMSA陰性であった。, Shittuらはまた、メチシリン耐性であるマンニトール陰性の黄色ブドウ球菌も報告した。 さらに、32nuc陽性の黄色ブドウ球菌の分離株の八DNase陰性(25%)であった。 RaoらはDnase陰性Staphylococcusaureusを報告したが,これらの所見については説明はなかった。 Nucで確認された黄色ぶどう球菌の分離株以外の六つのぶどう球菌はMSA上に黄色のコロニーを産生し,他の研究者によって同様の所見が報告された。 この研究の別のまれな発見は、DNase陽性であるがMSA陰性およびチューブコアグラーゼ陰性(すなわち)であった分離株であった。, 非黄色ブドウ球菌)。 この分離株はStaphylococcusschleiferi subspであったと推定した。 国民の標準的な方法に従ってまた陽性DNaseであるcoagulans。

単一表現型試験は、黄色ブドウ球菌の同定のために非効率的である

我々は、黄色ブドウ球菌を検出する際の個々のテストの性能を評価するため, MSAの成長は最も敏感(94%の感度)であり、次いでTCT(ヒトおよびヒツジ血漿、それぞれ91%および81%の感度)であり、DNase試験は最も敏感ではなかった(75%の感度)。 逆に、DNase試験は最も特異的(96%特異性)であり、次いでMSA(79%特異性)であり、TCT(ヒト血漿およびヒツジ血漿)は最も特異的ではなかった(それぞれ11%および7%)表3。 全体として、調査された個々の試験のうち、MSA上の成長は黄色ブドウ球菌(94%の感度および79%の特異性)を同定するのに最適であった。, 我々の結果は、MSAに対してそれぞれ76.5%および99.6%の感度および特異性を報告したHanらの結果とはわずかに異なる。 D’Souzaらはまた、71%の感度を報告し、私たちよりも少し低かった。 黄色ぶどう球菌の検出のMSAの高い感受性はcoagulaseの陽性ぶどう球菌からのcoagulaseの陰性ぶどう球菌を区別する病原性のある黄色ぶどう球菌を隔離する機能が原因であることができます。,

表3感度、特異性、臨床黄色ブドウ球菌の一般的な診断試験の陰性/陽性予測値

チューブコアグラーゼの場合、ヒト血漿はヒツジ血漿よりも感度が高かった(91%対81%感度)。 このように、この設定では、売れ筋が見える、販売戦略が決羊プラズマの代わりの人のプラズマ内企業の話とその企業で活躍TCTs., 私たちのデータは、94-100%の感度が他の研究者によって報告された以前の調査結果と一致しています。 しかし、この研究では、ヒトおよびヒツジ血漿に対する感度は、54.5%(ヒト血漿)および45.5%(ヒツジ血漿)という低い値が報告された他の設定で報告されたも したがって、コアグラーゼ試験では、血漿の性能は設定によって異なり、血漿の選択は試験の効率に影響を与える可能性があります。 また、抗凝固剤としてのEDTAまたはクエン酸塩の使用は、試験の性能に影響を及ぼす。, 注目すべきことに、クエン酸塩は利用される腸球菌のcoagulaseの反作用だけに影響を与えますが、黄色ブドウ球菌のような有機体を作り出すcoagulaseに影響を与えません。

DNase試験は、75%の感度および96%の特異性を有し、これは、75%の感度および100%の特異性が報告された他の研究に匹敵する。 この研究では、DNase試験はすべての試験の中で最も特異的であり、偽陽性分離株の数が最も少なかった(偽陽性は一つだけであった)。, これは、DNase試験がTCTよりも優れていると報告された他の報告と一致していた。 MSAの成長も非常に特異的であった(79%特異性)が、最も特異的な試験はチューブコアグラーゼ(ヒトおよびヒツジ血漿、それぞれ11%および7%特異性)であった。

対照的に、他の研究では、Tctを有するヒトおよびヒツジ血漿に対して高い特異性(93.6%)が報告された。, Staphylococcus delphiniおよびStaphylococcus intermediusはまれな臨床分離株であり、Staphylococcus hyicu sは不確定である(有病率は11%から89%の範囲である)。 これらの分離株の有病率は、特定の設定で高い可能性があります。, MSAおよびDNaseに高い特異性および感受性があったが、個々のテストとして、黄色ブドウ球菌の定期的な同一証明の使用は他の細菌分離株を検出する機能によって削減され、主に最初のスクリーニングの間に使用されます。 実際、マンニトール塩陽性CoNS(Staphylococcus caprae、S.hemolyticusおよびS.saprophyticus)は、ナイジェリアおよび日本で報告されている。, 従って、ある特定の設定では、黄色ブドウ球菌を識別するのにそれぞれ使用されたら共通の表現型テストは不十分かもしれません;ある分離株は黄色ブドウ球菌またはCoNSとして、誤って識別されます。

MSAとDNaseの組み合わせは、チューブコアグラーゼ試験を改善します

我々は、TCTのパフォーマンスの向上を目指して、黄色ブドウ球菌を検出する際のテストの組み合わせ(すなわちMSA/DNase/TCT)の感度と特異性を評価しました。, 我々は、DNase/MSAの組み合わせ(92%の特異性)を除いて、テストの組み合わせで黄色ブドウ球菌を検出する際の絶対特異性(100%)を達成しました。 逆に、試験の組み合わせの感度は異なり、MSA/DNase/TCT(ヒト血漿)が最も感度が高い(75%感度)のに対し、MSA/DNase/TCT(ヒツジ血漿)は最も感度が低い(25%感度)であった(表3)。

MSA/DNaseの組み合わせは、それぞれ92%および96%の特異性および感度をもたらし、これは黄色ブドウ球菌の同定のための選択の組み合わせであろう。, しかし、両方の試験は黄色ブドウ球菌に特異的ではなく、他の細菌分離株を検出することができるので、二重の組み合わせはTCTを改善するためにのみ 他の試験の組み合わせ-MSA/DNase/TCT(ヒト血漿)およびMSA/TCT(ヒト血漿)は100%の特異性を有していたが、それらは感度(それぞれ75%および33%)を変化させていた。 この系統において、MSA/DNase/TCT(ヒト血漿)の組み合わせは、MSA/TCT(ヒト血漿)の組み合わせ(100%特異性、75%感度)よりも黄色ブドウ球菌の同定に優れている(100%特異性、33%, 同様に、DNase/TCT(羊血漿)とMSA/TCT(羊血漿)とMSA/DNase/TCT(羊血漿)の組み合わせは絶対特異性(100%)を持っていたが、感度(それぞれ50%、25%および67%)を変化させた。

したがって、チューブコアグラーゼの効率は、DNaseおよびMSAの両方を含む同時試験によって改善することができる。 より高い感受性および特定性のために、黄色ブドウ球菌の続編の同一証明はMSA、DNaseおよびTCTと始まるかもしれません。 注目すべきは、TCTの改善された特異性は、最初に観察された高感度を有意に変化させなかったことである。, TCTs/DNase前のMSAの使用は人間の伝染からますます回復されている群生の要因陰性および管のcoagulaseの肯定的なぶどう状球菌が強く推奨された原因です。 これらの分離株はまた熱安定性DNaseを作り出し、黄色ブドウ球菌として誤って識別することができます。 但し、これらの緊張はマルトース、ラクトースおよびマンニトールから酸を作り出す失敗によって黄色ブドウ球菌から区別することができます。 さらに、Staphylococcus aureusのまれな株は、コアグラーゼ陰性であり得るが、動物分離株(S.intermidius、S.hyicus、S.delphiniおよびS.schleiferi subsp., coagulans)はチューブコアグラーゼ陽性であり、これらの分化にはMSA上での増殖も必要である。

予測値

MSAの成長は最も高い陰性予測値(NPV)を有し、次いでDNaseを有し、チューブコアグラーゼは最も低いNPVを有した(最初に観察された高感度と一致しなかった、表3 逆に、試験の組み合わせは、DNase/MSAを除いて絶対Npv(100%)を与えた(NPVは92%)、表3。, 試験の組み合わせ、特にTCTを含むものの高いNpvは、試験の組み合わせが黄色ブドウ球菌の日常的な同定において確実に使用できることを明らかにす DNaseは最も高い陽性予測値(PPV)を有し、次いでMSA(それぞれ96%および83%)が続いた。 逆に、チューブコアグラーゼ単独では平均Ppv(54%および50%)が得られた(表3参照)。 興味深いことに、試験の組み合わせは高いPpvをもたらし、DNaseを含むものは最も高いPpv(95%)を有する(表3を参照)。, したがって、Npvに関しては、単離株をDnaseおよびMSAと同時に同定することにより、TCTの特異性を改善することができる。

したがって、黄色ブドウ球菌の臨床分離株の理想的な同定には、一連の試験が必要である。 黄色ブドウ球菌の伝染は高いHIV/AIDSの流行の設定の他の細菌によってそれらより頻繁、特にです。 これはよりよい処置の結果を達成するために隔離集団の正しい同一証明を保証する。, 感度および特異性を改善するための選択肢が提示されるので、これらのデータは臨床標本における黄色ブドウ球菌同定に関して改善されるであろう。

勧告

臨床標本からの黄色ブドウ球菌のルーチン同定のために、我々はウサギや馬のプラズマが容易に利用できない設定で(MSA、DNaseおよびチューブコアグラーゼの成長から始まる)すべての三つのテストを同時に使用することをお勧めします。, 他の種(ウサギ,ヤギ,ブタ,ウシなど)からのプラズマのスクリーニングは,Tctを用いたヒト血漿よりも安価で安全であり,より効率的であると報告されている。 さらに、臨床staphylococcal分離株のgenotypingはCoNSの分離株をspeciateし、ウガンダの人間の標本のまれなStaphylococcus aureusそして動物の分離株の流行を定めるために推薦されます。

コメントを残す

メールアドレスが公開されることはありません。 * が付いている欄は必須項目です