この試験は、過酸化水素(H2O2)からの酸素の放出を触媒する酵素であるカタラーゼの存在 酵素のカタラーゼを、連鎖球菌のような非カタラーゼ作り出す細菌からぶどう状球菌のような、作り出すそれらの細菌を区別することを使用します。 通常3%H2O2は定期的な文化のために15%H2O2が嫌気性菌でカタラーゼの検出のために使用される間、使用されます。,
カタラーゼ試験の原理
酵素カタラーゼは、過酸化水素の酸素と水への分解を仲介します。 細菌単離物中の酵素の存在は、小さな接種物が過酸化水素に導入され、酸素泡の迅速な精緻化が起こるときに明らかである。 カタラーゼの欠如は、気泡の生産の欠如または弱いことによって明らかである。 文化は24時間以上古いべきではありません。,
細菌は、好気性炭水化物の代謝の最終生成物として蓄積される過酸化水素の致死効果から身を守ります。
カタラーゼ試験の目的または用途
- 形態学的に類似した腸球菌性連鎖球菌(カタラーゼ陰性)およびブドウ球菌(カタラーゼ陽性)は、カタラーゼ試験
- 好気性および偏性嫌気性細菌を区別するのにも有用である。
- 半定量カタラーゼ試験は、結核菌の同定に使用されます。,
- これは、カタラーゼ陰性であるクロストリジウムの好気性株を陽性であるバチルス種と区別するために使用される。
- カタラーゼ試験は、腸内細菌科の同定の助けとして使用することができる。
カタラーゼ試験の手順
- 試験管に1-2mlの過酸化水素溶液を注ぎます。
- 滅菌木製の棒またはガラス棒を使用して、18-24時間試験生物のいくつかのコロニーを取り、過酸化水素溶液に浸します。
- すぐにバブリングするように観察してください。,
スライド法
- 清潔で乾燥したガラススライドの表面に少量のコロニー成長を移すために、ループまたは滅菌木製の棒を使用してください。
- ガラススライドに3%H2O2のドロップを置きます。
- 酸素バブルの進化を観察します。
カタラーゼ試験の結果解釈と例
陽性:多量の泡が生成され、活性な泡立ち
例:ブドウ球菌、微小球菌、リステリア、Corynebacterium diphtheriae、Burkholderia cepacia、Nocardia、Enterobacteriaceae科(Citrobacter、E., コリ、Enterobacter、Klebsiella、赤痢菌、Yersinia、Proteus、Salmonella、Serratia)、シュードモナス、Mycobacterium tuberculosis、Aspergillus、CryptococcusおよびRhodococcus equi。
陰性:気泡が発生しないか、またはごくわずかです。
例:連鎖球菌およびEnterococcus spp
カタラーゼ試験の品質管理
陽性:黄色ブドウ球菌–ATCC33592
陰性:Enterococcus faecalis–ATCC29212
カタラーゼ試験の注意事項
- 試験生物は、血液寒天培, 赤血球はカタラーゼを含み、存在は偽陽性テストを与えます。
- 文化は18-24時間齢でなければなりません。
- 過酸化水素は非常に不安定であるため、新鮮でなければなりません。
- 鉄ワイヤーループは使用しないでください。
- いくつかの細菌は、過酸化水素の分解を触媒するペルオキシダーゼを産生し、反応を弱陽性にする(いくつかの泡がゆっくりと詳述される)。 これは本当に肯定的な反応と混同すべきではありません。
- 特に鉄containing有接種ループが使用される場合、試薬に生物を添加しないでください。, 鉄containing有ループは、過酸化水素にさらされると偽陽性の試験結果を引き起こす。