L’emocitometro è diviso in 9 quadrati principali di dimensioni 1mm x 1mm. I quattro quadrati coner (identificati dal quadrato rosso) sono ulteriormente suddivisi in 4 x 4 griglie. L’altezza della camera formata con il vetro di copertura è di 0,1 mm, quindi una camera da 1 mm x 1 mm x 0,1 mm ha un volume di 0,1 mm3 o 10-4 ml.

Per contare le cellule utilizzando un emocitometro, aggiungere 15-20µl di sospensione cellulare tra l’emocitometro e il vetro di copertura utilizzando un Pipetman P-20., L’obiettivo è di avere circa 100-200 celle/quadrato. Contare il numero di celle in tutti e quattro i quadrati esterni dividere per quattro (il numero medio di celle / quadrato). Il numero di celle per quadrato x 104 = il numero di celle / ml di sospensione. Questo protocollo funziona bene sia per le cellule di mammifero aderenti che sono state tripsinizzate o per le cellule di sospensione comprese le cellule di insetti Sf9. I globuli rossi sono in genere troppo piccoli e numerosi per questo protocollo e utilizzano invece il quadrato centrale.

Al termine, spruzzare l’emocitometro e coprire con etanolo al 70% per uccidere le cellule., Lavare entrambi con acqua deionizzata e asciugare con un Kimwipe. Avvolgere in un Kimwipe pulito e tornare alla scatola di immagazzinaggio. Nota, i vetrini di copertura per l’emocitomero sono fatti di uno speciale vetro più spesso / piatto. Si prega di cercare di evitare di rompere o perderlo. Se lo fai, riordinare hemocytomer copertura scivola, non regolare copertura scivola.