Il test della coagulasi è stato tradizionalmente utilizzato per differenziare lo Staphylococcus aureus dagli stafilococchi coagulasi-negativi. S. aureus produce due forme di coagulasi (cioè coagulasi legata e coagulasi libera). La coagulasi legata, altrimenti nota come” fattore di aggregazione”, può essere rilevata eseguendo un test di coagulasi in vetrino e la coagulasi libera può essere rilevata utilizzando un test di coagulasi in provetta.
Slide testEdit
Un test di coagulasi slide viene eseguito con un controllo negativo per escludere autoagglutinazione., Due gocce di soluzione salina vengono messe sul vetrino etichettato con numero di campione, Test (T) e controllo (C). Le due gocce saline vengono emulsionate con l’organismo di prova utilizzando un anello di filo, filo dritto o bastone di legno. Una goccia di plasma (si raccomanda il plasma di coniglio anticoagulato con EDTA) viene posta sulla goccia salina inoculata corrispondente al test e mescolata bene, quindi il vetrino viene scosso delicatamente per circa 10 secondi.
- Se “positivo”, si osserverebbe un ammasso macroscopico nel plasma entro 10 secondi, senza alcun ammasso nella goccia salina.,
- Se ‘negativo’, non si osserveranno raggruppamenti.
Se la prova della coagulasi dello scorrevole è negativa, una prova della provetta dovrebbe seguire come conferma. L’aggregazione in entrambe le gocce è un’indicazione di autoagglutinazione, quindi è necessario eseguire un test in provetta. La prova della provetta non è eseguita ogni istituzioni ma la maggior parte del risultato dipende dalle colture ematiche dal laboratorio.,
Test in provamodifica
Un coagulo di fibrina formato in una provetta dalla reazione di coagulasi
Il test in provetta utilizza plasma di coniglio che è stato inoculato con una colonia stafilococcica (cioè cocchi gram-positivi che sono catalasi positivi). Il tubo viene quindi incubato a 37 °C per 1,5 ore. Se negativo, l’incubazione viene continuata fino a 18 ore.
- Se “positivo” (ad esempio, la colonia sospetta è S., aureus), il plasma si coagulerà, causando un coagulo (a volte il coagulo è così pronunciato, il liquido si solidificherà completamente).
- Se ‘negativo’, il plasma rimane un liquido. Il risultato negativo può essere S. epidermidis, ma solo un test di identificazione più dettagliato può confermarlo, utilizzando test biochimici come nei metodi di test analitici dell’indice di profilo. Un falso negativo può essere percepito se il campione non viene lasciato raffreddare per circa 30 minuti a temperatura ambiente o 10 minuti nel congelatore, dato che il siero può sciogliersi. Se veramente negativo, il siero rimarrà liquido dopo il raffreddamento.,
- Elenco degli stafilococchi coagulasi-positivi: Staphylococcus aureus subsp. anaerobius, S. aureus subsp. golden, S. dolphin, St. hyicus, S. intermedius, S. lutrae, e Staphylococcus schleiferi subsp. coagulani.
- Elenco di stafilococchi coagulasi-negativi di significato clinico: S. saprophyticus, S. cohnii subsp. cohnii, S. cohnii subsp. urealyticum, S. captitus subsp. captitus, S. warneri, S. man, S. epidermidis, S. della capra e S. di lione