Sejtszámolás Hemocitométerrel

a hemocitométert 9 fő négyzetre osztják 1 mm x 1 mm méretű. A négy kúpos négyzetet (amelyet a Vörös tér azonosított) tovább osztjuk 4 x 4 rácsokra. A fedélüveggel kialakított kamra magassága 0,1 mm, tehát egy 1 mm x 1 mm x 0,1 mm-es kamra térfogata 0,1 mm3 vagy 10-4 ml.

a sejtek hemocitométerrel történő megszámolásához adjunk hozzá 15-20 µl sejtszuszpenziót a hemocitométer és a fedőüveg közé P-20 pipettával., A cél az, hogy nagyjából 100-200 sejt / négyzet legyen. Számolja meg a cellák számát mind a négy külső négyzetben, négyre osztva (a cellák/négyzetek átlagos száma). A sejtek száma négyzetenként x 104 = a sejtek száma/ml szuszpenzió. Ez a protokoll jól működik mind a tripszinizált, mind a szuszpenziós sejtek esetében, beleértve az Sf9 rovarsejteket is. A vörösvértestek jellemzően túl kicsik és sokak ehhez a protokollhoz, és inkább a középső négyzetet használják.

Ha elkészült, permetezze be a hemocitométert és fedje le 70% etanollal, hogy elpusztítsa a sejteket., Mossa le mind ionmentesített vízzel, mind törölje szárazra egy Kimwipe-vel. Csomagoljon be egy tiszta Kimwipe-t, majd térjen vissza a tárolódobozba. Ne feledje, hogy a hemocitomer fedőlapjai speciális vastagabb/laposabb üvegből készülnek. Kérjük, próbálja meg elkerülni a törést vagy elvesztését. Ha igen, rendezze át a hemocytomer fedelét, nem pedig a szokásos fedőlapokat.

Vélemény, hozzászólás?

Az email címet nem tesszük közzé. A kötelező mezőket * karakterrel jelöltük