Ez a vizsgálat kimutatja a kataláz jelenlétét, egy enzimet, amely katalizálja az oxigén felszabadulását a hidrogén-peroxidból (H2O2). Arra használják, hogy megkülönböztessék azokat a baktériumokat, amelyek enzimkatalázt, például staphylococcusokat termelnek a nem katalázt termelő baktériumoktól, például streptococcusoktól. Általában 3% H2O2-t használnak a rutin tenyészethez, míg 15% H2O2-t használnak a kataláz kimutatására anaerobokban.,
A Katalázteszt elve
az enzimkataláz a hidrogén-peroxid oxigénre és vízre történő lebontását közvetíti. Az enzim jelenléte egy bakteriális izolátumban nyilvánvaló, amikor egy kis inokulumot hidrogén-peroxidba vezetnek be, az oxigénbuborékok gyors kidolgozása megtörténik. A kataláz hiánya nyilvánvaló hiánya vagy gyenge buboréktermelés. A kultúra nem lehet több, mint 24 óra.,
a baktériumok ezáltal megvédik magukat az aerob szénhidrát-anyagcsere végtermékeként felhalmozódott hidrogén-peroxid halálos hatásától.
A Katalázteszt célja vagy felhasználása
- a morfológiailag hasonló Enterococcusor Streptococcus (kataláz negatív) és Staphylococcus (kataláz pozitív) a katalázteszt segítségével differenciálható.
- szintén értékes az aerob és kötelező anaerob baktériumok megkülönböztetésében.
- a Mycobacterium tuberculosis azonosítására szemikvantitatív kataláz tesztet alkalmaznak.,
- a Clostridium aerotoleráns törzseinek megkülönböztetésére szolgál, amelyek kataláz negatívak, a pozitív Bacillus fajoktól.
- a Katalázteszt felhasználható az Enterobacteriaceae azonosításának elősegítésére.
Katalázteszt eljárása
- öntsön 1-2 ml hidrogén-peroxid oldatot egy kémcsőbe.
- steril fapálcával vagy üvegpálcával vegye be a 18-24 órás tesztszervezet több telepét, majd merítse a hidrogén-peroxid oldatba.
- figyelje meg az azonnali buborékolást.,
Slide Method
- használjon hurkot vagy steril fából készült botot, hogy kis mennyiségű kolónia növekedjen egy tiszta, száraz üvegcsúszda felületén.
- helyezzen egy csepp 3% H2O2-t az üvegcsúszdába.
- figyelje meg az oxigénbuborékok fejlődését.
Eredmény Értelmezése Kataláz Teszt Példák
Pozitív: Bőséges buborékok előállított, aktív fortyogó
Példa: Staphylococcus baktériumok, Micrococci, Listeria, Corynebacterium diphtheriae, Burkholderia cepacia, Nocardia, az enterobacteriaceae családba (Citrobacter, E., coli, Enterobacter, Klebsiella, Shigella, Yersinia, Proteus, Salmonella, Serratia), Pseudomonas, Mycobacterium tuberculosis, Aspergillus, Cryptococcus és Rhodococcus equi.
negatív: nincs vagy nagyon kevés buborék keletkezik.
Példa: Streptococcus, valamint Enterococcus spp
Minőség-Ellenőrzés a Kataláz Vizsga
Pozitív: Staphylococcus aureus– ATCC 33592
Negatív: Enterococcus faecalis– ATCC 29212
Óvintézkedések a Kataláz Vizsga
- A vizsgált szervezetek nem kell venni a véres agar kultúra., A vörösvértestek katalázt tartalmaznak, és jelenlétük hamis pozitív tesztet eredményez.
- a kultúrának 18-24 órának kell lennie.
- a hidrogén-peroxidnak frissnek kell lennie, mivel nagyon instabil.
- vas huzalhurok nem használható.
- egyes baktériumok peroxidázt termelnek, amely katalizálja a hidrogén-peroxid lebomlását, ami a reakció gyengén pozitív; (néhány buborék lassan kidolgozott). Ezt nem szabad összekeverni egy igazán pozitív reakcióval.
- ne adjon hozzá organizmust a reagenshez, különösen, ha vastartalmú inokulációs hurkokat használnak., A hurkokat tartalmazó vas hamis pozitív vizsgálati eredményeket okoz, ha hidrogén-peroxidnak van kitéve.