00: 00: 05.21 Hello. Beszélni fogok veled a DNS félig konzervatív
00:00:10.01 replikációjáról. Nem annyira a technikai részleteket, de arról, hogy Frank Stahl én
00:00:16.19 végül a kísérlet azt mutatta, hogy a DNS –
00:00:20.20 ismétlések által a két láncok szétesett,
00:00:23.10 minden, hogy egy új példányt, majd két,
00:00:27.10 amelyek mindegyike egy régi láncot, majd egy újat.
00:00: 30.,24nehéz tudni, hogy hol kezdjem az adott történetet
00: 00:34.06 de hadd kezdjem a kiadvány 1953
00:00: 38.00 a papír Watson and Crick. Valójában két papír volt
00:00:41.29 a természetben. Az első a modellépítésen alapuló
00:00:45.01 szerkezetről, valamint a röntgendiffrakcióból származó kis információról volt szó
00:00:50.15 a röntgendiffrakció természetesen nem mondta el a szerkezetet.
00: 00: 54.09 elmondta neked valamit az ismétlési távolságról a spirál mentén.
00: 00: 58.14 azt mondta, hogy ez egy spirál, és nagyon kevés több.
00: 01: 02.,05A modellépület modellépület volt,
00: 01: 04.27, így a szerkezet biztosan nem bizonyított.
00:01:07.13 ez egy javaslat volt, és sokan nem hitték el
00: 01: 10.20, vagy talán nem is figyeltek rá.
00: 01: 13.10 a második tanulmány azt javasolta, hogy a molekula hogyan replikálódhat. A két lánc szétválna, mindegyik a felületén vezetne
00: 01:22.26 egy új lánc kialakulása, így
00:01:25.11 végén két kettős spirál jön létre, mindegyiknek
00:01: 28.03 az egyik régi lánc és egy vadonatúj lánc.
00: 01: 30.23 ez az úgynevezett félig konzervatív replikáció.,
00:01:33.20 a Caltech-nél Max Delbruck, aki ismerte Jim Watsont és levelezett vele
00: 01: 40.01 pesszimista volt a replikációs rendszerrel kapcsolatban.
00: 01: 44.05 pesszimista a félig konzervatív replikációval kapcsolatban.
00: 01:47.07 a láncokat egymás köré tekerték, így ahhoz, hogy szétválasszák őket
00:01:50.19 hacsak nem szakítja meg őket, lazítania kell az alapvető kettős spirált
00:01: 55.18, hogy a két kar külön legyen.
00: 01: 56.27 Max szerint ez lehetetlen, hidronamikusan lehetetlen.
00:02:01.11, ezért javasolta, hogy talán a két láncot
00: 02: 05 rendszer választja el.,21. minden egyes nukleotid lebontása
00:02:09.12 a lánc mentén. Ő és Günther Stent megjelentettek egy
00:02:12.17 című tanulmányt, amely három különböző módszert javasolt a DNS-replikációra.
00: 02:15.27 félig konzervatív, ahogy Watson és Crick megjósolta,
00:02:19.29 konzervatív, amelyben legalább fogalmilag talán volt
00:02:22.28 egy módja annak, hogy egy kettős spirál irányítsa a
00:02:26.09 kialakulását egy másik kettős spirál, mint a közelben
00:02: 28.19, így soha nem kellett elválasztania a láncokat.
00:02:33.,01 vadonatúj dupla spirál és egy teljesen régi dupla spirál lenne, és ez lenne a replikáció cselekedete.
00: 02: 39.12, majd diszperzív, a harmadik út, megtöri az egyes láncokat, elválasztja a darabokat, majd mindent újra összead.
00: 02: 47.18 meglátogattam Maxet az irodájában. Kémiában voltam.
00: 02: 52.24 Linus Pauling tanítványa voltam.
00:02:55.01 Max véget ért a biológiában, és azt mondta nekem
00:02:57.04 erről a problémáról, és eszembe jutott, hogy talán lehet
00:03:01.17 kísérletet tenni a DNS replikációjának módjának megismerésére
00:03:06.,04A nehéz izotópok használata alapján.
00: 03:08.15 bárcsak lenne időm elmondani, hogy miért gondoltam a nehéz izotópokra
00:03:12.08, de ennek köze volt egy olyan tanfolyamhoz, amely szerencsés volt
00:03: 16.11 Linus Pauling tanfolyamának a kémiai kötés természetéről.
00:03:19.10, amelyben a deutérium-és hidrogénkötések fontos szerepet játszottak.
00: 03:23.17 Mindazonáltal az ötlet az volt, hogy a DNS-t valami nehéz címkével jelöljük,
00:03: 29.00 nem hiszem, hogy arra gondoltam, Ó, igen, akkoriban deutérium volt.
00:03:33.,05majd a címkét a növekvő baktériumok vagy fágok
00:03:37.11 nehéz közegben, deutérium közegben,
00:03:40.00, majd kapcsolja át a növekedést könnyű közegre
00:03:42.15, majd tegye mindezt a centrifugába, és nézze meg, hol a
00:03:45.20 DNS ment fel a csúcsra, ha beállította a sűrűség jobb
00:03:49.12 ha minden világos volt, akkor az alsó, ha minden nehéz,
00:03:54.03, középen pedig félig nehéz, félig könnyű.
00: 03:57.05 ez egy leegyszerűsítés, de így gondoltam a kísérletre
00:04: 01.09 abban az időben., Ez valamikor 1954 körül volt.
00:04:05.14 ezután elmentem Woods Hole-ba tanársegédként
00:04:08.25 Jim Watson számára (az előző ciklusban a Caltechnél élt)
00:04:14.02 a fiziológia tanfolyamon.
00: 04:17.13 és egy nap tanársegédként ezen a kurzuson
00:04:20.17 Jim Watson és Sydney Brenner, akik a tanfolyamot tanították,
00:04:24.11 az emeleti szobában voltak A Lillie building nevű épületben, a Marine Biological Lab-ban,
00:04:30.24 és Jim az ablakon át nézett, és egy fára mutatott
00:04: 33.,18 amögött egy ember ült, aki volt, távolról sem tudta megmondani,
00: 04:38.05 de gin-tonikot árult.
00: 04:40.18 volt egy nagy korsó gin és egy nagy dolog tonik, néhány jég, néhány pohár és néhány limes,
00:04: 45.22 és ő eladni gin és tonik a járókelők, és a nyereség tudott vásárolni egy kis gin és tonik magának.
00: 04: 51.06 ez volt az úgynevezett gin and tonic fa.
00: 04:53.29 de Jim azt mondta, hogy ez a fickó nagyjából magára gondolt,
00:04:57.15 szóval adjunk neki egy nagyon kemény kísérletet a fiziológia osztályban,
00:05: 02.,14A híres Hershey-Chase kísérlet két ember által végzett egy ideig,
00: 05:06.02 Hershey and Chase, és nézd meg, ha Stahl tudta csinálni az egészet egy délután
00:05: 08.28 egyedül. Nos, azt hittem, hogy elég rohadt, hogy összeáll ez a szegény srác
00: 05: 13.13 így lementem, és bemutatkoztam neki, és azt mondta neki, hogy mi vár rá.
00:05:18.07 és elmondta, mit csinál a fággenetikában
00: 05: 21.07, jövőre pedig a Caltechnél lesz.
00: 05:23.28 így megállapodtunk abban, hogy megpróbáljuk ezt a kísérletet együtt, magunk, hogyan DNS replikálja
00:05: 29.,03amikor Caltech-be ment. Először be kellett fejeznem a röntgenkristallográfiámat
00:05:33.25 mielőtt Frank megengedné, hogy elkezdjük, mert azt mondta, hogy rossz lenne, ha a karakterem elindulna, és új projektet indítana
00:05:40.14 amikor még nem fejeztem be a diplomamunkámat,
00:05:43.03 ami röntgenkristallográfia volt.
00: 05:44.19 végül elvégeztem a röntgenkrisztallográfiát
00:05: 47.21 és elkezdhettük a kísérletet.
00: 05:50.05 Frank és én úgy döntöttünk, hogy dolgozzuk ki a
00:05:52.26 módszert erre a sűrűség gradiens centrifugálásra
00:05: 55.,24és tehát elég hosszú időt töltöttünk, több mint egy évet,
00: 06: 00.00 olyan módszer kifejlesztése, amely elválaszthatja a makromolekulákat sűrűség-gradiensben.
00:06:04.09 és ehhez tiszta DNS-t tettünk be
00:06:07.03 centrifugába, majd bekapcsoltuk, hogy lássuk, mi történik
00:06:10.16 és csodálkozásunkra sűrűséggradiens alakult ki
00:06: 14.20 a szemünk előtt.
00: 06:16.14 ennek oka az volt, hogy a cézium ion meglehetősen nehéz, meglehetősen sűrű, és
00:06:22.10 hajlamos az aljára telepedni egy erős centrifugális Mezőben
00:06: 26.,09és a diffúzió azt akarja, hogy menjen vissza, hogy újra elosztja azt
00: 06:29.25 és egyensúlyban van egy sűrűség gradiens, amelyben több cézium-klorid
00:06: 34.25 az alsó rész közelében, mint a felső közelében.
00:06: 36.27, így a sűrűség gradiens automatikusan kialakul.
00: 06: 40.08 erre nem számítottunk.
00: 06:41.13 láttuk, hogy ez megtörténik, azt gondoltuk, hogy előformázott sűrűségi gradienst kell készíteni
00:06:45.00 a centrifuga cellában
00:06: 49.00 de maga a centrifuga teszi a sűrűség gradienst.
00:06:51.,14így egy hosszú történet rövid, mi nőtt a baktériumok nehéz nitrogén közegben
00: 06:57.14 majd miután sok generációs növekedés, úgy, hogy minden lenne
00:07:01.26 kell címkézni nehéz nitrogén, váltottuk a baktériumokat, centrifugálás őket, majd resuspending őket
00:07:07.25 egy könnyű közegben, és vett mintákat különböző időpontokban.
00: 07:11.26 az első kísérletben Frank figyelmeztetett, hogy összekeverem, ha egyszerre mindkét irányba megyek,
00:07: 18.14 ha nehéznek, könnyűnek és nehéznek.
00: 07: 20.16 és azt mondtam: “nem, színkódolom a csöveket”, és teljesen összekevertem.
00:07:25.,25Így nem volt világos, hogy pontosan mely csövek voltak. A második kísérlet
00: 07:30.28 az első számú kísérletet jelöltük, és ezt publikáltuk,
00:07: 35.14 a 2.számú kísérlet mellett, amely ismétlés volt.
00: 07:38.23 és természetesen azt találtuk, hogy
00:07: 42.09 a baktériumok egy generációban csak egyfajta DNS-t tartalmaztak.
00:07: 46.25 a sűrűség félúton volt a nehéz és a könnyű között.
00: 07:49.26 és a második baktériumgenerációban kétféle DNS létezett:
00: 07: 53.19 félig nehéz és teljesen könnyű.
00:07: 56.27 most meg kellett írnunk ezt a papírt., Valójában meglehetősen lassúak voltunk, amikor megírtuk
00: 08:01.06, így Max Delbruck elvitt minket a tengerészgyalogos laborba
00:08: 04.26 a Corona del Mar-ban, és bezárott minket egy toronyszobába.
00: 08: 08.00 szó szerint megtette. Mary Delbruck, Max felesége ételt hozott nekünk,
00:08:11.25, de aztán újra bezárta az ajtót,
00:08:15.05 amíg mi – és volt egy írógép-
00:08:16.13 amíg el nem készítettünk egy kézirattervezetet, amit megtettünk.
00: 08: 20.06, de volt egy kérdés, hogyan kell ezt írni.
00: 08: 22.01 kétféleképpen tárgyaltunk.
00:08:24.,20egy módja annak, hogy egy hipotézissel kezdjük, a Watson-Crick hipotézis,
00: 08: 28.25 és mondjuk itt egy teszt, ezt a kísérletet végezzük.
00:08: 31.26 és nézd meg, hogy úgy működik-e, ahogy mondták.
00: 08:36.13 és ez minden bizonnyal az egyik módja annak, hogy egy kísérlet, Richard Feynman, aki nagyon közel volt a diákok akkoriban
00:08: 41.26 ő jön át a mi felek, és így tovább. Úgy gondolta, hogy így kellene megírnunk.
00: 08:47.08 a másik út az lenne, hogy pontosan megírja, amit a kísérleted mondott, nem több, nem kevesebb
00:08: 53.,19minden hipotézisre való hivatkozás nélkül,
00: 08: 56.00, majd a végén mondja meg, hogy Egyetért-e valamilyen hipotézissel.
00: 09:00.15 az utolsó utat választottuk, részben azért, mert azt gondoltuk, nos, ha hipotézist próbálunk tesztelni,
00:09:07.01 az egyetlen módja annak, hogy valóban biztosak legyünk abban, hogy igaza lesz
00:09: 10.03 az összes lehetséges hipotézis ismerete.
00: 09:13.26 és mivel senki sem tudhatja meg az összes lehetséges hipotézist
00:09:16.06 csak azért, mert a kísérleted egyetérthet az egyikkel
00:09: 18.29 nem bizonyítja, hogy ez a helyes hipotézis.
00:09:21.,02lehet, hogy egy másik, hogy a kísérlet egyetért
00:09:24.20 így úgy tűnt, hogy nekünk elegánsabb, hogy írjon a papír
00:09:27.21 up szempontjából alegységek, és csak a végén azt mondják,
00:09:30.19″ah, ezek alegységek lehet az egyetlen láncok a Watson-Crick modell,”
00:09:35.13 amelyek természetesen voltak. Szóval ezt tettük.
00:09:37.22 majd ez a diagram itt mutatja az eredményt tekintve alegységek
00:09: 42.10 nem DNS láncok. Amit tettünk, az sok baleset volt.
00: 09:48.11 a baleset, hogy a Caltech,
00:09: 50.,02A Woods Hole-ban való találkozás balesete,
00: 09:52.10 az a baleset, amikor Max Delbruck lenyűgözött téged
00:09:55.27 mély pesszimizmusával, hogy a DNS nem tudta megismételni
00:09:59.07 a Watson és Crick úgy működik, ahogy van.
00: 10:02.26 és végül az a baleset, amikor kiderült, hogy maga a centrifuga
00:10:06.16 sűrűség-gradienst eredményez, nem kell
00:10: 09.06 hogy egy már létező.
00: 10: 11.01 a kísérlet hatása érdemes mondani valamit.
00: 10:14.13 amikor a DNS szerkezetét javasolták, sok
00:10: 16.,14 ember nem hitte el.
00:10:18.01 és nem sok utalás volt rá a szakirodalomban.
00:10:20.18 az 1953 utáni első néhány évben.
00: 10: 24.04 végül is modellépítésen alapult, ami nem bizonyít semmit.
00: 10:27.23 olyan szépnek tűnt, hogy néhány ember meg volt győződve
00:10: 31.04 hogy helyesnek kell lennie, mert annyira helyesnek tűnt.
00: 10: 34.19 mások azt hiszem meg voltak győződve arról, hogy nem lehet helyes, mert túl jónak tűnt ahhoz, hogy igaz legyen.
00:10:40.04 mindenesetre csak modell volt.
00:10: 44.,09A röntgendiffrakció bizonyítékai valóban nem voltak nagyon támogatóak.
00:10:48.22 azt mutatta, hogy az ismétlési távolság bizonyos
00:10:52.04 távolság, és hogy spirális, de nem lehetett
00:10:54.14 következtetni a korai röntgenfelvételek részleteire.
00: 10:58.02 azt hiszem, a kísérletünk hatása nem volt igazán felfedezés,
00:11: 02.22 pszichológiai hatás volt. A DNS valódinak tűnt. Hirtelen lehetett
00:11:07.22 lásd sávok egy centrifuga.
00:11:09.27, ami pont úgy viselkedett, ahogy Watson és Crick mondta.
00:11:14.,02és úgy gondolom, hogy a kísérlet fő értéke
00:11:18.04 volt, hogy pszichológiai értéke meggyőzte sok embert
00:11:21.18 hogy a DNS-szerkezetnek helyesnek kell lennie.
00: 11: 24.29 hadd mondjak valamit erről a molekuláról.
00: 11: 27.20 ez a molekula lényegében egy egész időszakot adott a molekuláris biológia fejlődésében.
00: 11:34.12 itt van ez a kettős spirál, ott áll,
00:11:36.16 és azt mondja: “Itt vagyok. Két láncom van. Menj és derítsd ki, hogyan másolok.”
00: 11: 41.13 ” itt vagyok. Négyféle bázisom van.”
00: 11: 44.,05 ” menj kitalálni, hogyan alakul át, hogy a fehérjék.”
00:11:47.26″a magban ülök. A fehérjéket az eukarióták citoplazmájában állítják elő.”
00:11:52.21″menj, Találd ki, mi az, ami ezt az információt tőlem a citoplazmába viszi.”
00:11:56.21″az ezen alapokból származó információim időnként megváltoznak.”
00:12:01.09″ez az úgynevezett mutáció. Menj, Találd ki, hogyan történik ez.”
00:12:04.08″időnként van valami úgynevezett genetikai rekombináció.”
00:12:08.10″..”Amit itt próbálok mondani
00:12:11.,16az, hogy ha megmutatnám neked egy poliszacharid modelljét,
00: 12: 14.18 megmondaná, hogy milyen kísérletet kell tennie?
00:12:17.11 ez a molekula, a DNS, olyan, mint az Óz varázslója
00:12:20.11 ott áll (kivéve a varázslóval ellentétben, ez egy igazi molekula)
00:12:24.04 ott áll, és lényegében elmondja neked az egész napirendet
00: 12: 29.25 a tudomány jövőjéért a következő 20 évben.
00:12:32.07 ez egy teljesen más hangulat és attitűd, azt hiszem,
00:12:37.03 az előtte haladó tudománytól
00: 12: 39.15 és az azt követő biológiai tudománytól.,
00: 12: 42.25, tehát ez volt a pénznem ebben az időben.
00: 12: 44.06 a DNS-molekula mondta el, mi volt a probléma, és mit kellett megoldani.