00:00:05.21 Hei. Aion puhua semi-konservatiivinen
00:00:10.01 DNA-replikaation. Ei niin paljon tietoa teknisistä yksityiskohdista, vaan siitä, miten Frank Stahl ja minä
00:00:16.19 päätyi tekemään kokeen, joka osoitti, että DNA:
00:00:20.20 jäljittelee kahden ketjut hajoaa,
00:00:23.10 jokainen tehdä uuden kopion ja sitten saat kaksi,
00:00:27.10 joissa kussakin on yksi vanha ketju ja yksi uusi.
00: 00: 30.,24It on vaikea tietää, mistä aloittaa mitään erityistä tarinaa
00:00:34.06, mutta aloitan julkaisu vuonna 1953
00:00:38.00 paperin Crick ja Watson. Oli oikeastaan kaksi lehteä
00:00:41.29 luonnossa. Ensimmäinen oli noin rakenne
00:00:45.01, joka perustui malli rakennus ja hieman tietoa X-ray diffraction
00:00:50.15 X-ray diffraction ei varmasti kertoa rakenne.
00:00:54.09, että Se kertoi jotain toista etäisyys pitkin helix.
00: 00: 58.14 se kertoi, että kyseessä oli helix ja hyvin vähän muuta.
00: 01: 02.,05mallirakennus oli mallirakennus,
00:01:04.27, joten rakennetta ei varmastikaan todistettu.
00:01:07.13, Tämä oli ehdotus, ja monet ihmiset eivät usko sitä.
00:01:10.20, tai ehkä ei edes kiinnitä mitään huomiota.
00:01:13.10 toinen lehti ehdotti, miten molekyyli voisi toistua. Kaksi ketjut olisivat erillisiä, kunkin oppaan sen pinta
00:01:22.26 muodostumista uuden ketjun, niin olisit
00:01:25.11 päätyä kahden hengen heliksejä, jokaisella on
00:01:28.03 vanhoja ketjuja ja yksi uusi ketju.
00: 01: 30.23, jota kutsutaan puolikonservatiiviseksi replikaatioksi.,
00:01:33.20 Caltech, Max Delbrück, joka tiesi, että Jim Watson ja oli kirjeenvaihdossa hänen kanssaan
00:01:40.01 oli pessimistinen tämän replikointi järjestelmä.
00: 01: 44.05 pessimistinen puolikonservatiivisesta replikaatiosta.
00:01:47.07 ketjut oli kierretty toistensa ympärille, niin saat ne toisistaan
00:01:50.19, ellet rikkoa niitä, sinun täytyy rentoutua perus double helix
00:01:55.18 saada kaksi kättä erikseen.
00: 01: 56.27 Max ajatteli, että tämä olisi mahdotonta, hydronamisesti mahdotonta.
00:02:01.11 käytetyt Ja niin hän ehdotti, että ehkä kaksi ketjut erotettu järjestelmä
00:02:05.,21breaking every several nucleotides along
00:02:09.12 the chain. Ja hän julkaisi Gunther stentin kanssa paperin
00:02:12.17, jossa ehdotettiin kolmea eri menetelmää DNA: n replikointiin.
00:02:15.27 Semi-konservatiivinen, kuten Watson ja Crick oli ennustanut,
00:02:19.29 konservatiivinen, jossa ainakin käsitteellisesti ehkä siellä oli
00:02:22.28 siten, että double helix voisi ohjata muodostumista
00:02:26.09 toinen double helix aivan kuten se on lähellä
00:02:28.19, ja niin sinun ei tarvitse erillisiä ketjuja ollenkaan.
00: 02: 33.,01You olisi uusi double helix ja täysin vanhan double helix, ja että olisi
00:02:37.02 toimi lisääntymään.
00:02:39.12 Ja sitten dispersiivinen, kolmas tapa, rikkoa yhden ketjut, erillinen kappaletta, ja sitten laittaa kaiken takaisin yhteen.
00:02:47.18 vierailin Maxin luona hänen toimistossaan. Olin kemiassa.
00: 02: 52.24 olin Linus Paulingin oppilas.
00:02:55.01, Max oli yli Biologia, ja hän kertoi minulle,
00:02:57.04 tästä ongelmasta, ja se tapahtui minulle, että ehkä voisi
00:03:01.17 tehdä kokeilu selvittää tilassa DNA-replikaation
00:03:06.,04 perustuu raskaiden isotooppien käyttöön.
00:03:08.15 kunpa minulla olisi aikaa kertoa teille miksi ajattelin noin raskaita isotooppeja
00:03:12.08, mutta se on tekemistä sen kanssa, ottaa kurssin, joka oli pala onnea
00:03:16.11 Linus Pauling on kurssin luonteesta kemiallinen sidos.
00:03:19.10, jossa deuterium ja vetysidokset tärkeä rooli.
00:03:23.17 Kuitenkin, ajatus oli etiketti DNA-jotain raskasta,
00:03:29.00 en ajatellut kyllä, se oli deuterium ajattelin tuolloin.
00: 03: 33.,05Then merkitä sitä kasvattamalla bakteereja tai faagien
00:03:37.11 heavy medium, deuterium medium
00:03:40.00, ja sitten vaihtaa kasvu valo, keskipitkän
00:03:42.15, ja sitten laittaa kaikki tämä sentrifugoidaan ja näyttää niin nähdä, missä
00:03:45.20 DNA-meni-ylös, jos voit säätää tiheys.
00:03:49.12, jos se oli kaikki valo, pohjaan jos se oli raskas,
00:03:54.03 ja lähi-jos se oli raskas puoli ja puoli valoa.
00:03:57.05, Että on yksinkertaistava, mutta niin olen ajatellut kokeilla
00:04:01.09 tuolloin., Tämä tapahtui noin vuonna 1954 joskus.
00:04:05.14 menin sitten Woods Hole assistenttina
00:04:08.25 Jim Watson (hän oli elänyt Caltech edellinen termi)
00:04:14.02 vuonna fysiologian kurssin.
00:04:17.13, Ja yksi päivä kuin opetuksen avustaja, että kurssi
00:04:20.17 Jim Watson ja Sydney Brenner, jotka olivat opetuksen aikana,
00:04:24.11 olivat yläkerrassa huone rakennuksessa nimeltä Lillie rakennus, Marine Biologinen Laboratorio,
00:04:30.24, ja Jim katsoi ikkunan läpi ja huomautti alas puu
00:04:33.,18under joka istui mies, joka oli, et voinut kertoa etäältä,
00:04:38.05, mutta hän oli myymässä giniä ja tonic.
00:04:40.18 Hän oli iso kannu giniä ja iso asia, tonic, ja jäätä ja jotkut lasit ja jotkut limetin,
00:04:45.22, ja hän myisi giniä ja tonic ohikulkijoille, ja voitot hän voisi ostaa joitakin giniä ja tonic itselleen.
00: 04: 51.06 sen nimi oli The gin and tonic tree.
00:04:53.29, Mutta Jim oli selvää, että tämä mies uskoi melko paljon itsestään,
00:04:57.15, joten annetaan hänelle todella kova kokeilla tehdä Fysiologian tunneilla,
00:05:02.,14 kuuluisa Hershey-Chase kokeilu tehdä kaksi ihmistä, yli ajan,
00:05:06.02 Hershey ja Chase, ja katso jos Stahl voisi tehdä sen kaikki yhdessä iltapäivällä
00:05:08.28 itse. No ajattelin, että oli aika mätä jengi tämä huono kaveri
00:05:13.13, Joten menin alas ja esittelin itseni hänelle ja kertoi hänelle, mitä oli varattuna hänelle.
00:05:18.07, Ja hän kertoi minulle, mitä hän oli tekemässä faagin genetics
00:05:21.07, ja että hän olisi Caltech ensi vuonna.
00:05:23.28, Joten päätimme yrittää tehdä tämän kokeen yhdessä, itse, miten DNA monistuu
00:05:29.,03 kun hän pääsi Caltechiin. Minun täytyi lopettaa minun X-ray crystallography ensimmäinen
00:05:33.25, ennen kuin Frank olisi aloitetaan, koska hän sanoi, että se olisi haitaksi omalle merkki mennä eteenpäin ja aloittaa joku uusi projekti
00:05:40.14, kun en ollut valmis opinnäytetyö,
00:05:43.03, joka oli X-ray crystallography.
00:05:44.19 vihdoin sain röntgenkristallografian tehtyä
00:05:47.21 ja voisimme aloittaa kokeilun.
00:05:50.05 Frank ja minä päätimme, että meidän pitäisi kehittää menetelmä
00:05:52.26, että teet tämän tiheys kaltevuus sentrifugoimalla
00:05:55.,24and joten vietimme melko pitkään, yli vuosi,
00:06:00.00 kehittää menetelmä, joka voisi erottaa makromolekyylejä tiheys kaltevuus.
00:06:04.09, Ja tehdä, että meidän laittaa puhdasta DNA:
00:06:07.03 osaksi sentrifugoidaan ja kääntyi sitä katsomaan, mitä oli tapahtumassa
00:06:10.16, ja meidän yllättyneenä tiheys kaltevuus oli muodostaen
00:06:14.20 silmiemme edessä.
00:06:16.14 Tämä johtui siitä, että cesium-ion on melko raskas, melko tiheä, ja se
00:06:22.10 taipumus laskeutua pohjalle voimakas keskipako-kenttä
00:06:26.,09and diffuusio haluaa mennä takaisin jopa levittää sitä.
00:06:29.25 ja tasapainotilassa sinulla on tiheys kaltevuus, joka on enemmän cesium-kloridi
00:06:34.25 alaosassa kuin yläosassa.
00:06:36.27 ja niin tiheysgradientti muodostuu automaattisesti.
00: 06: 40.08 emme odottaneet tätä.
00:06:41.13 näimme sen tapahtuvan, ajattelimme, että meidän täytyy tehdä esimuotoillut tiheys kaltevuus
00:06:45.00 sentrifugiin cell
00:06:49.00, mutta sentrifugin itse tekee tiheys kaltevuus.
00: 06: 51.,14So voit tehdä pitkän tarinan lyhyesti, me kasvoi bakteerien raskas typen keskipitkän
00:06:57.14 ja sitten monen sukupolven kasvua, niin että kaikki
00:07:01.26 olla merkitty raskas typpeä, vaihdoimme bakteerit, linkoamalla niitä ja sekoittaminen niitä
00:07:07.25 kevyt keskipitkän ja otti näytteitä eri aikoina.
00:07:11.26 ensimmäinen kokeilu Frank varoitti minua, en olisi sekoita se ylös, jos tein molempiin suuntiin kerralla,
00:07:18.14, jos tein raskas ja kevyt raskas.
00:07:20.16 ja sanoin: ”ei, minä väritän putket”, ja sekoitin sen kokonaan.
00: 07: 25.,25So oli epäselvää, mitkä putket olivat mitkä. Toinen kokeilu
00:07:30.28 meidän merkitty kokeilu numero yksi ja että on mitä me julkaistiin,
00:07:35.14 yhdessä kokeilu numero 2, joka oli toista.
00:07:38.23 ja mitä me tietysti löysimme oli se, että
00:07:42.09 yhden sukupolven bakteereilla oli vain yhdenlaista DNA: ta.
00:07:46.25 sillä oli tiheys puolivälissä raskaan ja kevyen välillä.
00:07:49.26 Ja toisessa bakteeri-sukupolvi, siellä oli kaksi erilaista DNA: ta,
00:07:53.19 puoliaika raskas, ja täysin valoa.
00: 07: 56.27 Now we had to write this paper up., Itse asiassa olimme melko hidas, kirjallisesti sitä
00:08:01.06, ja niin Max Delbrück vei meidät marine lab
00:08:04.26 Corona del Mar, ja lukitsi meidät torni huone.
00: 08: 08.00 hän kirjaimellisesti teki. Mary Delbrück, Max vaimo, toisi meille ruokaa,
00:08:11.25, mutta sitten lukittu ovi uudelleen,
00:08:15.05, kunnes olemme – ja siellä oli typewriter-
00:08:16.13, kunnes olemme laatineet luonnoksen käsikirjoituksen, jonka teimme.
00:08:20.06, Mutta siellä oli kysymys, miten kirjoittaa tämä ylös.
00: 08: 22.01 oli kaksi tapaa, joista keskustelimme.
00: 08: 24.,20One tapa on aloittaa hypoteesin, Watson-Crick hypoteesi,
00:08:28.25 ja sanoa, tässä on testi, voimme tehdä kokeen.
00: 08: 31.26 ja katsotaan, toimiiko se niin kuin sanottiin.
00:08:36.13, Ja se on varmasti yksi tapa tehdä kokeilu, ja Richard Feynman, joka oli hyvin lähellä opiskelijat niinä päivinä
00:08:41.26, että Hän voisi tulla meidän osapuolille ja niin edelleen. Hän ajatteli, että meidän pitäisi kirjoittaa se niin.
00:08:47.08 toinen tapa olisi kirjoittaa ylös, mitä kokeilun sanoi, ei enempää, ei vähempää
00:08:53.,19without viittaus mahdollisesti hypoteeseja ollenkaan,
00:08:56.00, ja sitten aivan lopussa sanoa, onko se voi sopia jokin hypoteesi.
00:09:00.15 valitsimme viimeinen keino, osittain siksi, että ajattelimme, hyvin, jos olet yrittää testata hypoteesia,
00:09:07.01 ainoa tapa olla varma, että aiot olla oikeassa
00:09:10.03 on tietää kaikki mahdolliset hypoteesit.
00:09:13.26, Ja koska kukaan ei voi tietää kaikkia mahdollisia hypoteeseja
00:09:16.06 vain siksi kokeilu saattaa samaa mieltä yksi niistä
00:09:18.29 ei todista, että se on oikea hypoteesi.
00: 09: 21.,02There voisi olla toinen, että kokeilun kanssa samaa mieltä siitä,
00:09:24.20, Joten se tuntui meistä enemmän tyylikäs kirjoittaa meidän paperi
00:09:27.21 kannalta alayksikön, ja vasta lopussa sanoa,
00:09:30.19″ah, nämä alayksikön voisi olla yhden ketjut Watson-Crick malli,”
00:09:35.13, joka tietenkin he olivat. Niin me siis teimme.
00:09:37.22, Ja sitten tämä kaavio täällä näyttää tuloksen kannalta alayksikön
00:09:42.10, ei DNA-ketjut. Tekomme siunattiin monilla onnettomuuksilla.
00:09:48.11 Caltechin onnettomuus,
00: 09: 50.,02the onnettomuus tavata toisiaan Woods Hole,
00:09:52.10 onnettomuuden ottaa Max Delbrück vaikutuksen
00:09:55.27 hänen syvä pessimismi, että DNA ei voinut jäljitellä
00:09:59.07, että Crick ja Watson toimi niin se ei.
00:10:02.26, Ja lopulta sattumalta selville, että sentrifugin itse
00:10:06.16 tekee tiheys kaltevuus, sinun ei tarvitse
00:10:09.06 tehdä ennestään yksi.
00:10:11.01 kokeilun vaikutuksesta kannattaa sanoa jotain.
00:10:14.13 kun DNA:n rakennetta ehdotettiin, erä
00:10: 16.,14 ihmistä ei uskonut sitä.
00:10:18.01, Ja ei ollut paljon viittauksia kirjallisuudessa.
00:10:20.18 ensimmäisten vuosien ajan vuoden 1953 jälkeen.
00:10:24.04 loppujen lopuksi se perustui mallirakentamiseen, joka ei todista mitään.
00:10:27.23 se näytti niin kauniilta, että jotkut vakuuttuivat
00:10:31.04, että sen piti olla oikein, koska se näytti niin oikealta.
00:10:34.19 muut ihmiset olivat mielestäni vakuuttuneita siitä, ettei se voisi olla oikein, koska se näytti liian hyvältä ollakseen totta.
00:10:40.04 joka tapauksessa, se oli vain malli.
00:10: 44.,09 röntgendiffraktiosta saadut todisteet eivät olleet kovin kannustavia.
00:10:48.22 Se osoitti, että toista etäisyys oli tietty
00:10:52.04 etäisyys ja että se oli kierteiset, mutta et voinut
00:10:54.14 päätellä mitään yksityiskohtia kuin jo X-ray kuvia.
00:10:58.02 luulen, että kokeilumme vaikutus ei ollut oikeastaan löytö,
00:11:02.22 se oli psykologinen vaikutus. Se sai DNA: n näyttämään aidolta. Yhtäkkiä voisi
00:11:07.22 nähdä bändejä sentrifugissa.
00:11:09.27, että käyttäytyivät juuri niin kuin Crick ja Watson sanoi.
00:11:14.,02And luulen, että tärkein arvo kokeilu oli
00:11:18.04, että se oli psykologinen arvo vakuuttava paljon ihmisiä
00:11:mikä vastaa 21, 18, että DNA: n rakenne oli varmasti oikeassa.
00:11:24.29 Anna minun sanoa jotain siitä, että molekyyli.
00:11:27.20 tämä molekyyli käytännössä antoi käskyn kokonaiselle ajanjaksolle molekyylibiologian kehityksessä.
00:11:34.12 Tässä on tämä kaksoiskierre, seisomassa siellä,
00:11:36.16, ja se sanoo, ”Täällä minä olen. Minulla on kaksi ketjua. Ota selvää, miten replikoin.”
00:11:41.13″Here I am. Minulla on neljänlaisia tukikohtia.
00:11:44.,05 ” mene selvittää, miten se muunnetaan tehdä proteiineja.”
00:11:47.26″istun ytimessä. Proteiinit muodostuvat sytoplasmassa eukaryooteissa.”
00:11:52.21″Mennä selvittää, mitä se on, että kestää tämän tiedon minut sytoplasmassa.”
00:11:56.21″näistä lähtökohdista koostuva tietoni muuttuu silloin tällöin.”
00:12:01.09″, jota kutsutaan mutaatioksi. Mene selvittämään, miten se tapahtuu.”
00:12:04.08″aina silloin tällöin on jotain niin sanottua geneettistä rekombinaatiota.”
00:12:08.10″go figure out how I am…”What I am trying to say here
00:12:11.,16is, että jos näytin mallia sanoa, polysakkaridi,
00:12:14.18 se olisi kertoa, mitä kokeilu pitäisi tehdä seuraavaksi?
00:12:17.11 Tämä molekyyli, DNA, on kuin wizard of Oz.
00:12:20.11 seisoo siellä (paitsi toisin kuin velho, tämä on todellinen molekyyli)
00:12:24.04 seisoo siellä ja kertoo pääosin koko agenda
00:12:29.25 tulevaisuuden tieteen seuraavat 20 vuotta.
00:12:32.07 Nyt, että on täysin eri tunnelma ja asenne, luulen,
00:12:37.03 alkaen tiede, joka meni ennen kuin se
00:12:39.15 ja biologinen tiede, joka tuli sen jälkeen.,
00:12:42.25, Niin oli valuutta tällä kertaa.
00:12:44.06 se oli DNA-molekyyli, joka kertoi, mitä ongelmat olivat ja mitä piti lähteä selvittämään.