Katalaasi Testi – Periaate, Käyttää, Menettely, Tuloksen Tulkinta Varotoimet

Tämä koe osoittaa läsnäolo katalaasi, entsyymi, joka katalysoi vapauttaa happea vetyperoksidia (H2O2). Sitä käytetään erottamaan ne bakteerit, joka tuottaa entsyymi, katalaasi, kuten stafylokokit, ei-katalaasi tuottavien bakteerien, kuten streptokokit. Yleensä 3% H2O2 käytetään rutiini kulttuuria, kun taas 15% H2O2 käytetään havaitsemiseen katalaasi vuonna anaerobeja.,

Periaatetta Katalaasi Testi

– entsyymin katalaasi välittää jakautuminen vetyperoksidia hapeksi ja vedeksi. Läsnäolo entsyymin bakteeri-isolaattia on selvää, kun pieni ymppi tuodaan vetyperoksidia, ja nopea laatiminen happea kuplia esiintyy. Katalaasin puute näkyy puutteellisena tai heikkona kuplatuotantona. Kulttuurin ei pitäisi olla yli 24 tuntia vanha.,

Bakteerien siten suojella itseään tappava vaikutus vetyperoksidia, joka on kertynyt, koska lopputuote aerobinen hiilihydraattien aineenvaihduntaa.

Tarkoitus tai Käyttää Katalaasi Testi

  • morfologisesti samanlainen Enterococcusor Streptococcus (katalaasi negatiivinen) ja Staphylococcus (katalaasi positiivinen) voivat olla eriytetty käyttää katalaasi testi.
  • on arvokas myös aerobisten ja velvoittavien anaerobisten bakteerien erottamisessa.
  • Mycobacterium tuberculosis-bakteerin tunnistamiseen käytetään Semikvantitatiivista katalaasitestiä.,
  • Sitä käytetään erottamaan aerotolerant kantoja Clostridium, jotka ovat katalaasi negatiivisia, Bacillus-lajit, jotka ovat positiivisia.
  • Katalaasitestiä voidaan käyttää apuna enterobakteerien tunnistamisessa.

Menettely Katalaasi Testi

  1. Kaada 1-2 ml vetyperoksidia ratkaisu osaksi koeputkeen.
  2. Käyttämällä steriiliä puutikun tai lasisauvalla, kestää useita siirtomaita 18 24 tunnin testi organismin ja upota vetyperoksidia ratkaisu.
  3. tarkkaile välitöntä kuplimista.,

liu ’ un Menetelmä

  1. Käytä silmukka tai steriili puutikun siirtää pieni määrä yhdyskunnan kasvu pinta puhdas, kuiva lasi-diaan.
  2. aseta lasiliukuun 3% H2O2: n pudotus.
  3. tarkkaile happikuplien kehittymistä.

Tuloksen Tulkinta Katalaasi Testi ja Esimerkkejä

Positiivinen: Runsas kuplat on tuotettu, aktiivinen kuplivaa

Esimerkkejä: Stafylokokit, Micrococci, Listeria, Corynebacterium diphtheriae, Burkholderia cepacia, Nocardia, Enterobakteereita (Citrobacter, E., coli, Enterobacter, Klebsiella, Shigella, Yersinia, Proteus, Salmonella -, Serratia), Pseudomonas, Mycobacterium tuberculosis, Aspergillus -, Cryptococcus, ja Rhodococcus equi.

negatiivinen: ei tai hyvin vähän kuplia tuotettu.

Esimerkkejä: Streptococcus ja Enterococcus spp

laadunvalvonta Katalaasi Testi

Positiivinen: Staphylococcus aureus– ATCC 33592

Negatiivinen: Enterococcus faecalis– ATCC 29212

Varotoimet Katalaasi Testi

  • testiorganismit ei pitäisi ottaa veri-agar kulttuuria., Punasolut sisältävät katalaasia ja niiden läsnäolo antaa väärän positiivisen testin.
  • kulttuurin tulee olla 18-24 tuntia vanha.
  • vetyperoksidin on oltava tuoretta, koska se on hyvin epästabiili.
  • Rautalankasilmukkaa ei saa käyttää.
  • Jotkut bakteerit tuottavat peroksidaasi, joka katalysoi jakautuminen vetyperoksidi aiheuttaa reaktion heikosti positiivinen; (muutamia kuplia laadittu hitaasti). Tätä ei pidä sekoittaa todella positiiviseen reaktioon.
  • älä lisää eliötä reagenssiin, erityisesti jos käytetään rautaa sisältäviä siirrosilmukoita., Rautaa sisältävät silmukat aiheuttavat vääriä positiivisia testituloksia, jos ne altistuvat vetyperoksidille.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista. Pakolliset kentät on merkitty *