Cell Counting kanssa Hemocytometer

hemocytometer on divideded osaksi 9 suuret neliöt 1mm x 1mm kokoinen. Neljä kartioruutua (tunnistettuna punaisella neliöllä) jaetaan edelleen 4 x 4 ruudukkoon. Korkeus jaosto muodostettu kansi lasi on 0,1 mm, joten a-1 mm x 1 mm x 0,1 mm kammion tilavuus on noin 0,1 mm3 tai 10-4 ml.

laskea soluja käyttäen hemocytometer, lisää 15-20µl solun keskeyttäminen välillä hemocytometer ja kansi lasia käyttäen P-20 Pipetman., Tavoitteena on noin 100-200 solua / neliö. Laske kaikkien neljän ulomman ruudun solujen lukumäärä jakaantuu neljällä (solujen keskiarvo / neliö). Solujen lukumäärä neliötä kohti x 104 = solujen lukumäärä / ml suspensiota. Tämä protokolla toimii hyvin joko trypsiinoituihin kiinnittyneisiin nisäkässoluihin tai suspensiosoluihin, mukaan lukien Sf9-hyönteissoluihin. Punasolut ovat tyypillisesti liian pieniä ja lukuisia tähän protokollaan ja käyttää keskellä neliö sen sijaan.

kun se on valmis, ruiskuta hemosytometri ja peitä liukkaus 70-prosenttisella etanolilla solujen tappamiseksi., Pese molemmat deionisoidulla vedellä ja pyyhi kuiva Kimwipellä. Kääri puhtaaseen Kimwipeen ja palaa säilytyslaatikkoon. Huomaa, että hemosytomeerin peitelaput on valmistettu erityisestä paksummasta / tasaisemmasta lasista. Yritä välttää rikkomasta tai menettämästä sitä. Jos teet niin, hemocytomer cover lipsahtaa, ei säännöllisesti kansi lipsahtaa.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista. Pakolliset kentät on merkitty *