Denne test påvise tilstedeværelsen af katalase, et enzym, der katalyserer frigivelsen af ilt fra hydrogenperoxid (H2O2). Det bruges til at differentiere de bakterier, der producerer en en .ymkatalase, såsom stafylokokker, fra ikke-katalaseproducerende bakterier, såsom streptokokker. Normalt anvendes 3% H2O2 til rutinekulturen, mens 15% H2O2 anvendes til påvisning af katalase i anaerober.,

princip for katalase Test

en .ymet katalase formidler nedbrydningen af hydrogenpero .id til ilt og vand. Tilstedeværelsen af en .ymet i et bakterieisolat er tydeligt, når et lille inokulum indføres i hydrogenpero .id, og den hurtige udarbejdelse af iltbobler forekommer. Manglen på katalase fremgår af mangel på eller svag bobleproduktion. Kulturen bør ikke være mere end 24 timer gammel.,

bakterier beskytter sig derved mod den dødelige virkning af Hydrogenpero .id, der akkumuleres som et slutprodukt af aerob kulhydratmetabolisme.

Formål eller Anvendelser af Katalase-Test

• morfologisk ligner Enterococcusor Streptokokker (katalase negativ) og Staphylococcus (katalase positiv) kan opdeles ved hjælp af den katalase test.
• også værdifuld ved differentiering af aerobe og obligatoriske anaerobe bakterier.
• Semiantiuantitative catalase test anvendes til identifikation af Mycobacterium tuberculosis.,
• det bruges til at differentiere aerotolerante stammer af Clostridium, som er katalase negative, fra Bacillusarter, som er positive.
• katalase test kan bruges som en hjælp til identifikation af Enterobacteriaceae.

fremgangsmåde ved Katalasetest

1. hæld 1-2 ml hydrogenpero .idopløsning i et reagensglas.
2. brug en steril træpind eller en glasstang til at tage flere kolonier af 18 til 24 timers testorganisme og nedsænk i hydrogenpero .idopløsningen.
3. Overhold for øjeblikkelig bobling.,

glidemetode

1. brug en løkke eller steril træpind til at overføre en lille mængde kolonivækst i overfladen af et rent, tørt glasglas.
2. anbring en dråbe på 3% H2O2 i glasglasset.
3. observere for udviklingen af iltbobler.

Fortolkning af Resultatet af Katalase Test og Eksempler

Positiv: Rigelige bobler produceret, aktive boblende

Eksempler: Stafylokokker, Micrococci, Listeria, Corynebacterium diphtheriae, Burkholderia cepacia, Nocardia, familien Enterobakterier (Citrobacter, E., coli, Enterobacter, Klebsiella, Shigella, Yersinia, Proteus, Salmonella, Serratia), Pseudomonas, Mycobacterium tuberculosis, Aspergillus, Slækning, og Rhodococcus equi.

negativ: ingen eller meget få producerede bobler.

Eksempler: Streptococcus og Enterococcus spp

kvalitetskontrol af Katalase-Test

Positiv: Staphylococcus aureus ATCC 33592

Negative: Enterococcus faecalis– ATCC 29212

Forholdsregler i Katalase-Test

• test-organismer bør ikke tages fra blood agar kultur., Røde blodlegemer indeholder katalase, og deres tilstedeværelse vil give en falsk positiv test.
• Kultur skal være 18 til 24 timer gammel.
• Hydrogenpero .id skal være frisk, da det er meget ustabilt.
• Jerntrådsløjfe bør ikke bruges.
• nogle bakterier producerer en pero .idase, der katalyserer en nedbrydning af hydrogenpero .id, hvilket får reaktionen til at være svagt positiv; (et par bobler udarbejdes langsomt). Dette bør ikke forveksles med en virkelig positiv reaktion.
• tilsæt ikke organisme til reagens, især hvis der anvendes jernholdige inokuleringssløjfer., Jernholdige sløjfer vil medføre falske positive testresultater, hvis de udsættes for hydrogenpero .id.