antiglobulin, eller Coombs test er en del af en kompatibilitetstest, at enhver patient, der vil modtage en røde blodlegemer transfusion skal gennemgå. Denne test er også vigtig i det diagnostiske arbejde hos patienter med anæmi, hvis oprindelse ikke let bestemmes, og når etiologien skal identificeres nøjagtigt.

i 1945 beskrev Robin Coombs, Arthur Mourant og Rob Race en test til påvisning af anti-Rho (anti-D) ikke-agglutinerende antistoffer.,1 oprindeligt blev testen udtænkt af Robin Coombs som en del af hans postgraduate studier på Race and Mourant ‘ s laboratory i Cambridge, England i 1945. Hans mål var at studere egenskaberne af de antistoffer, der er involveret i forbindelse med, hvad der blev kendt som føtal erythroblastosis, som nu er kendt som hæmolytisk sygdom hos nyfødte (HDN), der forårsages hyppigst af uforenelighed mellem en Rh-negativ moder sensibiliserede under en tidligere graviditet, der producerer IgG anti-D antistoffer i stand til at passere placenta barrieren på grund af deres lille størrelse, der derefter dække fosterets røde blodlegemer., Disse er senere fagocytoseret i milten og leveren, organer, der ud over deres andre funktioner opretholder ekstramedullær hæmatopoiesis i fosteret for at kompensere for anæmi som følge af hæmolyse. Senere blev Coombs-testen brugt til at demonstrere tilstedeværelsen af ufuldstændige antistoffer, der dækkede erytrocytterne in vivo, såsom det ses i tilfælde af autoimmun hæmolytisk anæmi (AHA). Beskrivelse af metoden og dens anvendelse i forskellige hematological sygdomme, blev offentliggjort i The Lancet og British Journal of Experimental Pathology i 1945 og 1946, hhv.,2

principperne i antiglobulin test er som følger: når immunoglobuliner af IgG-klassen (gammaglobulin) og komplement (beta-globulin) af menneskelig oprindelse, som er sprøjtet ind i forskellige kaniner, de producerer IgG-antistoffer mod disse globulin, som senere blandet i laboratoriet for at producere det brede spektrum Coombs reagens, der bruges i det daglige blod bankpraksis., Kaninen er IgG antiglobulin molekyler, der fungerer som en bro, der forener de ufuldstændige IgG-antistoffer, der dækker tilstødende røde blod celler, der forårsager agglutination og visualisering af reaktionen med det blotte øje, som kan ses i et reagensglas eller gel-kort, fortolkes som en positiv Coombs test.

Der er to varianter af denne test. Når det anvendes til at detektere antistoffer bundet til erythrocytter in vivo, er det kendt som en direkte antiglobulintest eller direkte Coombs-test., På den anden side, når antiglobulin anvendes til at detektere tilstedeværelsen in vitro af frie antistoffer i serum efter inkubation i Coombs-fasen af cross match, er det kendt som en indirekte antiglobulintest eller en indirekte Coombs-test. Denne variant af testen er en, der er anvendt ved påvisning af anti-D antistoffer i moderens serum af kvinder, som er D-antigen negative, samt søge efter og identifikation af antistoffer i serum, når et panel af kommercielle erythrocytter, hvis fænotype er kendt, er ansat.,3,4

Ansøgningerden direkte Coombs test

• i undersøgelsen af antistoffer, såsom dem hos patienter med autoimmun hæmolytisk anæmi.

• i undersøgelsen af alloantistoffer, såsom hos nyfødte, der lider af hæmolytisk sygdom hos nyfødte.

• for at dokumentere en hæmolytisk transfusionsreaktion.

den indirekte Coombs-test

• til påvisning af uregelmæssige antistoffer i patientens serum.

• Ved bestemmelse af fænotyper af røde blodlegemer.

• som en del af crossmatch testen.,

Manuelle og automatiske metoder til Coombs-test

Disse kan betragtes generelt: (1) reagensglas teknikker, som var traditionel, og er nu stort set ubrugt, (2) mikroplade teknikker, og (3) agglutination teknikker i gel kolonner. De faste fasemetoder (gel, glasperler og mikroplader) optrådte i 90 ‘ erne og har set generaliseret anvendelse i Me .ico siden år 2000. I øjeblikket er den mest anvendte teknik den for kort med gelkolonner.

Geltesten

i 1990 udviklede Lapierre et system af geltest.,5 af Disse var baseret på brug af dextran akrylamid gel partikler, en gel matrix, der fungerede som et filter, stoppe agglutinated røde blodlegemer i at passere igennem og dermed fældefangst røde blod celler på overfladen af gel i henhold til deres størrelse, som udgør en positiv test. En negativ reaktion danner en knap af ikke-agglutinerede røde blodlegemer i bunden af mikrotuben., Gelkortet indeholder 6 mikrotubes, som muliggør bestemmelse af 6 forskellige antigener og antistoffer, normalt ABO blodtype (direkte og omvendt) og Rh (D-antigen), kompatibilitetstest og Coombs-test. Disse test kan udføres manuelt eller automatisk.,5

Blandt fordelene ved automatisering er følgende: et større antal af prøver, der analyseres, vasket erythrocytter er ikke påkrævet, præcision og reproducerbarhed er forbedret, subjektivitet i fortolkningen af resultaterne er elimineret, kan resultatet blive bevaret for timer, og manuel arbejdskraft er reduceret, hvilket minimerer modtagelighed for fejl i de forskellige faser af testen.

den direkte Coombs-test

når den direkte antiglobulintest er positiv, betyder det, at ufuldstændige IgG-antistoffer eller fragmenter af komplementet (specifikt C3d) er til stede på erytrocytterne., På den anden side, når der ikke er nogen agglutination (en negativ test), er disse antistoffer ikke til stede på erytrocytternes overflade (fig. 1).6

En negativ direkte Coombs test betyder ikke nødvendigvis, at der ikke er nogen ufuldstændige antistoffer på de røde blodlegemer, da den sædvanlige reagenser til humant polyspecific antiglobulins, som anvendes dagligt i blodet banker, der kun reagerer, når der er mindst 200 IgG-molekyler eller mere per erythrocyt. På samme måde, hvis det involverede antistof er en IgA, som i nogle tilfælde af autoimmun hæmolytisk anæmi, vil testen være negativ, da standard Coombs-reagenset ikke indeholder anti-IgA-antistoffer.,7,8

Den indirekte Coombs-test

Den indirekte menneskelige antiglobulin test er positiv, når der er gratis IgG antistoffer i serum, som det er tilfældet med hæmolytisk sygdom hos nyfødte, den test er også rutinemæssigt anvendes til identifikation af uregelmæssige (uventede) antistoffer, der anvender en kommerciel panel af røde blodlegemer (Fig. 1).,6

konklusionen er, siden sin introduktion til kliniske laboratorier 70 år siden, Coombs test har udviklet sig teknisk og dets principper fortsat skal være gældende i dag, hvilket gør denne enkle og økonomiske at teste et af de mest alsidige og vigtigt, anvendes ved diagnosticering af hematological sygdomme, og i sikker praksis af transfusion medicine.der blev ikke ydet finansiel støtte.

interessekonflikt

forfatterne har ingen interessekonflikter at erklære.