celletælling med et Hæmocytometer

hæmocytometeret er opdelt i 9 større firkanter med 1 mm size 1 mm størrelse. De fire coner kvadrater (identificeret ved den røde firkant) er yderligere opdelt i 4 4 4 net. Højden af kammeret dannet med dækglaset er 0,1 mm, så et 1 mm.1 mm. 0,1 mm kammer har et volumen på 0,1 mm3 eller 10-4 ml.

for at tælle celler ved hjælp af et hæmocytometer tilsættes 15-20µl cellesuspension mellem hæmocytometeret og dækglas ved hjælp af en P-20 Pipetman., Målet er at have omkring 100-200 celler/kvadrat. Tæl antallet af celler i alle fire ydre firkanter divider med fire (det gennemsnitlige antal celler/firkant). Antallet af celler pr. kvadrat 104 104 = antallet af celler / ml suspension. Denne protokol fungerer godt for enten vedhæftede pattedyrsceller, der er blevet trypsiniseret, eller for suspensionsceller inklusive Sf9 insektceller. Røde blodlegemer er typisk for små og mange til denne protokol og udnytter den midterste firkant i stedet.

Når du er færdig, spray hæmocytometeret og dæk slip med 70% ethanol for at dræbe cellerne., Vask begge med deioniseret vand og tør tør med en Kimipeipe. Pakk en ren Kimipeipe ind og vend tilbage til opbevaringsboksen. Bemærk, at dækslet til hæmocytomeren er lavet af et specielt tykkere/fladere glas. Prøv at undgå at bryde eller miste det. Hvis du gør det, skal du omarrangere hemocytomer-dækslip, ikke regelmæssige dækslip.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret. Krævede felter er markeret med *