Tento test prokáže přítomnost katalázy, enzymu, který katalyzuje uvolňování kyslíku z peroxidu vodíku (H2O2). Používá se k odlišení bakterií, které produkují enzymovou katalázu, jako jsou stafylokoky, od bakterií produkujících nekatalázu, jako jsou streptokoky. Obvykle se 3% H2O2 používá pro rutinní kulturu, zatímco 15% H2O2 se používá pro detekci katalázy v anaerobách.,

princip katalázového testu

enzymová kataláza zprostředkovává rozpad peroxidu vodíku na kyslík a vodu. Přítomnost enzymu v bakteriálním izolátu je zřejmá, když se do peroxidu vodíku zavede malé inokulum a dochází k rychlému zpracování kyslíkových bublin. Nedostatek katalázy je patrný nedostatkem nebo slabou produkcí bublin. Kultura by neměla být starší než 24 hodin.,

Bakterie, a tím chránit před smrtící účinek peroxidu Vodíku, který se hromadí jako produkt aerobního metabolismu sacharidů.

Účel nebo Použití Kataláza Zkoušky

• morfologicky podobné Enterococcusor Streptococcus (kataláza negativní) a Stafylokoky (kataláza pozitivní), mohou být rozlišeny pomocí katalasy test.
• také cenné při diferenciaci aerobních a obligátních anaerobních bakterií.
• semikvantitativní katalázový test se používá k identifikaci Mycobacterium tuberculosis.,
• používá se k odlišení aerotolerantních kmenů Klostridia, které jsou negativní na katalázu, od druhů Bacillus, které jsou pozitivní.
• katalázový test lze použít jako pomůcku pro identifikaci Enterobacteriaceae.

Postup Kataláza Zkoušky

1. Nalijte 1-2 ml roztoku peroxidu vodíku do zkumavky.
2. pomocí sterilní dřevěné tyčinky nebo skleněné tyče vezměte několik kolonií testovaného organismu 18 až 24 hodin a ponořte se do roztoku peroxidu vodíku.
3. Sledujte okamžité probublávání.,

metoda skluzu

1. použijte smyčku nebo sterilní dřevěnou tyčinku k přenosu malého množství růstu kolonií na povrchu čistého suchého skleněného sklíčka.
2. do skleněného sklíčka vložte kapku 3% H2O2.
3. pozorujte vývoj kyslíkových bublin.

Výsledek Interpretace Kataláza Test a Příklady

Pozitivní: Hojný bubliny vyrábí, aktivní bublající

Příklady: Stafylokoky, Micrococci, Listeria, Corynebacterium diphtheriae, Burkholderia cepacia, Nocardia, čeledi Enterobacteriaceae (Citrobacter, E., coli, Enterobacter, Klebsiella, Shigella, Yersinia, Proteus, Salmonella, Serratia), Pseudomonas, Mycobacterium tuberculosis, Aspergillus, Cryptococcus, a Rhodococcus equi.

negativní: nevytvářejí se žádné nebo jen velmi málo bublin.

Příklady: Streptococcus a Enterococcus spp

Kontrola Kvality Kataláza Zkoušky

Pozitivní: Staphylococcus aureus– ATCC 33592

Negativní: Enterococcus faecalis– ATCC 29212

Upozornění Kataláza Zkoušky

• testovací organismy by neměly být brány z krevní agar kultury., Červené krvinky obsahují katalázu a jejich přítomnost poskytne falešně pozitivní test.
• kultura by měla být stará 18 až 24 hodin.
• peroxid vodíku musí být čerstvý, protože je velmi nestabilní.
• Železná drátěná smyčka by se NEMĚLA používat.
• některé bakterie produkují peroxidázu, která katalyzuje rozpad peroxidu vodíku, což způsobuje slabě pozitivní reakci; (několik bublin se pomalu rozpracovalo). To by nemělo být zaměňováno se skutečně pozitivní reakcí.
• nepřidávejte organismus do činidla, zejména pokud se používají inokulační smyčky obsahující železo., Smyčky obsahující železo způsobí falešně pozitivní výsledky testů, pokud jsou vystaveny peroxidu vodíku.